PCR(聚合酶链式反应)过程常用试剂介绍
时间:2024-10-21 阅读:37
PCR(聚合酶链式反应)是一种广泛应用于分子生物学研究中的技术,下面是在PCR反应过程中常用的试剂和设备:
试剂:
1、模板DNA:PCR反应需要模板DNA,如从细胞、组织、血液中提取DNA等;
2、引物:PCR反应的两个引物,分别与模板DNA的两端配对扩增所需的特定区域,引物也可以合成为TA克隆等过程中使用到的引物;
3、dNTPs:PCR反应中需要四种dNTPs,包括脱氧腺苷酸(dATP)、脱氧胸苷酸(dCTP)、脱氧鸟苷酸(dGTP)、脱氧胞嘧啶酸(dTTP),用于细胞分裂、DNA合成等生物学过程,用于PCR扩增的模板DNA链的延伸和扩增;
4、Taq DNA聚合酶:PCR反应需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,还有一些其他种类的聚合酶如PFU、Phusion等,用于扩增DNA链;
5、PCR buffer溶液:对PCR反应具有缓冲作用,调节反应pH,硫代硫酸氢盐SDS、小分子有机化合物如甲醛,可增强PCR反应特异性,从而提高反应效率;
6、酶切体系:PCR扩增往往涉及到重组、构建和测序等等实验步骤,常常需要进行酶切操作。
7、MARK:一种分子量标准,用来判别DNA片段大小的工具。
8、DNA纯化试剂盒:用于纯化PCR反应产物;