ELISA试剂盒实验的准则
时间:2023-03-09 阅读:348
ELISA试剂盒的关键技术参数包含板内差异性、板间差异性、批间差异性、重复性、特异性及穿插反响性、回收率等。假如试验君常常开展ELISA试验,主张运用同一厂家的试剂盒,这样可尽量保证数据的重复性(当然条件是试验条件的一致性)。关于科研用的定量ELISA试剂盒,不同的生产厂家运用的抗体对、酶以及底物、生产工艺和研制实力不尽相同,天然不同厂家试剂盒测出的数据会有差异。
一、依据样品中检测物水平来挑选试剂盒
假如试验君关于样品中待检物的水平没有任何可参阅的数据,挑选宽动力学检测规模的试剂盒。假如样品中待检物的含量很低,主张挑选高灵敏度的试剂盒。为了下降基质效应,有必要用稀释液至少做2倍稀释。假如样品中待检物含量远超过试剂盒的检测规模(标曲规模), 也需做恰当的倍数稀释。在计算结果时,需乘以相应的稀释倍数。
二、供货商资质评价
纵观国内外ELISA试剂盒供货商,“柏君”估计至少100余家。有些供货商可供给数百种常用目标ELISA,然而有些供货商则声称可供给数千种乃至上万种目标的试剂盒,但质量参差不齐,更有滥竽充数祸患科研之辈。那假如挑选供货商呢?
1、从同行或试验室同僚了解供货商的口碑,售前售后的处理状况。
2、查询供货商的网站具体了解相关目标,可查询这些目标是否现已开宣布特异性抗体?假如查遍全球连抗体都还不行获取,又怎么开宣布ELISA试剂盒呢? 第3、尤其是SCI期刊文章对供货商产品的引证。
4、了解供货商的研制前史和品牌史,许多供货商一再替换公司名或替换公司注册地,其间名堂试验君应该能悟出。不要迷信国外“品牌”,国外“品牌”。许多打着国外旗帜的公司,其实就是空壳的皮包公司,从全球OEM残次产品。国外供货商也有售后不给力的时分。
三、依据样本可获得性来挑选试剂盒
一般而言,商业化试剂盒的样品用量都在50ul或100ul, 但也有一些供货商的试剂盒对样品的用量要求可少至10ul。假如您的样品很宝贵或较难获取,则需求仔细考虑试剂盒对样品用量的要求。假如样品量少,ELISA试剂盒且要做多因子检测时更需慎重。