接触ELISA试剂盒实验多年，ELISA试剂盒操作过程复杂，从样本收集，实验操作，加样，洗涤，孵化都有很多注意事项，稍有不慎，将导致实验失败，本章将就ELISA试剂盒操作过程中的问题，与大家一起探讨。

(1)严格按照试剂说明书进行操作。操作前将试剂在室温下平衡30～60min。

(2)加样后及时放人孵箱。标本较多时，要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间，防止孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。

(3)封板温育时，各孔一定要封严，防止阳性标本的液体蒸发，产生周边现象从而导致“花板”的出现。

(4)用洗板机洗板时，保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干：还要防止针口有纤维蛋白或异物，这些异物在洗板的过程中易产生拖带现象而导致“花板”的出现。

(5)合理安排检测量，以免反应板过多造成洗板等待时间长。

(6)加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。

(7)显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。

(8)加样时保持显色剂不外流;A、B液应避免接触金属器械。加终止液时应避免产生气泡。

(9)应保证C清洁，整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸。

上海纪宁实业有限公司成立于上海，在上海张江高科园区拥有独立实验室，公司主力提供的生化产品有：酶联免疫试剂盒（ELISA试剂盒）、标准品、对照品、抗体、生化试剂、培养基、血清、细胞株、金标试剂盒等试剂产品。