产品类别：人源细胞系

　　生长特性：贴壁

　　生长培养体系：MACOY'S5A+10%FBS；37℃，5%CO2

　　传代方法：1：2传代

　　细胞形态：上皮细胞样

　　冻存条件：无血清细胞冻存液保存条件：95％（ViabilitybyTrypanBlueExclusion）

　　细胞英文(简称）U2OS；U2-OS；U-2OS(已通过STR鉴定）

　　细胞名称U2OS；U2-OS；U-2OS；人骨肉瘤细胞【已通过STR鉴定】

　　背景资料

　　该细胞系(原名2T)是由PontenJ和SakselaE在1964年从一名15岁女孩的胫骨中等分化的肉瘤中分离建立的。与WI-38共培养或用抗猴空泡病毒SV40、呼吸道合胞病毒RSV或腺病毒的补体结合试验（CF法）未检测到病毒。该细胞表达胰岛素样生长因子Ⅰ、Ⅱ（IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ）受体和骨肉瘤衍生生长因子（ODGF）。

　　细胞来源ATCCHTB-96

　　代次P3

　　规格T25

　　细胞数1x10^6cells

　　生物安全级别2

　　组织来源骨肉瘤

　　细胞形态贴壁

　　细胞活力95％（ViabilitybyTrypanBlueExclusion）

　　细胞检测细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌

　　培养条件MACOY'S5A+10%FBS；37℃，5%CO2

　　传代方法建议1:2-1:3两天换液一次

　　冻存条件90%FBS+10%DMSO

　　细胞收到后处理：

　　细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完quan培养液并封好瓶口是细胞运输的最hao办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作，培养箱静置2-4小时。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完quan培养液收集至离心管中，加入6ml完quan培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤。（注意发货的是密封培养瓶的话，放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松）

　　细胞培养步骤：

　　1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完quan培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

　　2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

　　1、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

　　1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

　　2.加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完quan培养基终止消化。

　　3.轻轻吹打细胞，完quan脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

　　4.按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6ml培养液的新皿中或者瓶中。

　　PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右完quan培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代