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面议PCR Amplification Kit扩增试剂盒
面议Magbind DNA methylation磁珠甲基化试剂盒
面议产品名称:AMPPD发光显色试剂盒
供应商:上海古朵
规格:50T
分类 :免疫印迹
储存条件:—20℃,避光,12个月
用途: 免疫印迹中,发光底物显色的方法之一。AMPPD又称二氧杂环乙烷。
备注: 主要由二氧杂环乙烷、磷酸盐缓冲液组成。
产品库存: 现货
有效期:12个月有效。
供应功能:现货,作为实验用品,供研究用,不能直接用于人体。
产品简介:AMPPD是碱性磷酸酶的化学发光底物,在适宜的缓冲液中,随着酶的催化水解作用,AMPPD分解成AMP-D,后者发出强度很高的光信号,其发光的速度取决于碱磷酶的浓度。当碱磷酶偶合到杂交的探针时,便可以通过此系统检测到杂交分子的存在量。乙醇胺可使光信号输出更理想。AMPPD为1,2-二氧环已烷衍生物,它是一种生物化学领域中的超灵敏的碱性磷酸酶底物,其特点:反应速度快,在很短时间内提供正确可靠的结果。在它的分子结构中有两个重要部分,一个是联接苯环和金刚烷的二氧四节环,它可以断裂并发射光子;另一个是磷酸根基团,它维持着整个分子结构的稳定。在通常情况下,这种化合物很稳定。但是,结果有碱性磷酸酶存在,Dioxetane Phosphate作为酶的底物会在酶的催化一脱去磷酸根基团,形成一个不稳定的中间体。这个中间体随即自行分解(二氧四节环断裂),同时发射光子。Leagene AMPPD发光显色试剂盒适用于PVDF膜,不推荐用于硝酸纤维素膜。
产品特点:
1、采用全进口原料:高效、灵敏、特异,严格引进技术标准进行批量生产。
2、先进的优化方案:重复性高,可靠性强,效果稳定。
3、购买本公司的产品,提供免费代测技术服务的,有技术疑问可以提供一对一的解答,存在质量问题可申请退换。
4、技术服务:专业,及时,耐心。
操作步骤(仅供参考):
1、临用前,取适量的A1和A2,等量混合后获得Dioxetane Buffer。
2、按2.5mgAMPPD溶于25ml Dioxetane Buffer, 配制0.1mg/ml AMPPD底物溶液即为AMPPD Dioxetane Buffer(发色发光显迹液),用于膜的染色。
3、取适量Dioxetane Buffer洗膜两次,每次15min。
4、对于PVDF膜进行的碱性磷酸酶反应, 膜置于新鲜配制的AMPPD Dioxetane Buffer 作用5min。
5、将膜移入适量的AMPPD Dioxetane Buffer中,浸泡5min(AP反应)。
6、取出PVDF膜,滴干水分,将膜正面朝下放在一张透明的塑料保鲜膜上,向后折叠将膜包裹起来,成为不漏水的封闭体。
7、在暗房中,将膜正面朝下放在感光胶片上,曝光数秒至数小时。
8、如需要,在室温下以适量的TBS洗膜15min。
9、将膜放入AMPPD Dioxetane Buffer,条带应在10~30min内出现。
10、用蒸馏水洗膜,终止反应。晾干后拍照留*的记录。
注意事项:
1、PVDF膜置于胶片上后,不要改变位置。
2、曝光时间应根据实验情况,自行摸索。
3、配制好的AMPPD Dioxetane Buffer,应避光低温保存。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。