如何选择多克隆抗体与单克隆抗体

　　多克隆抗体

　　特点：

　　识别任一抗原上的多个表位。所得血清为异质性抗体混合物，其亲和力各有不同。

　　多克隆抗体主要由 IgG 亚类组成。

　　通常使用多肽免疫原制备以表位为靶标的多克隆抗体，尤其是针对高同源性的蛋白家族。

　　优点：

　　多克隆抗体可识别任一抗原上的多个表位，因此具有以下优点:

　　高亲和性：由于靶蛋白上的多个表位能够结合不止一个抗体分子，多克隆抗体可放大低表达水平靶蛋白的信号。但是，这会影响定量实验(如流式细胞术实验)结果的准确性。

　　可识别多个表位，有利于免疫沉淀 (IP) 和染色质免疫沉淀 (ChIP) 实验获得更好的结果。

　　与单克隆抗体相比，对微小抗原变化(例如多态性、糖基化异质性或者轻微变性)的包容性更强。

　　可识别与免疫原蛋白质具有高度同源性的蛋白质，还可用于筛查非免疫原物种的靶蛋白。

　　通常是检测变性蛋白质的选择。

　　多表位通常可提升检测的稳定性。

　　缺点：

　　易产生批次间差异。

　　产生大量非特异性抗体，可能会在某些应用中产生背景信号。

　　由于具有多个表位，检测免疫原序列的交叉反应性非常重要。

　　不适用于探测抗原的特定结构域，因为抗血清通常会识别多个结构域。

　　单克隆抗体

　　特点：

　　不易产生批次间差异。

　　仅由一种抗体亚型组成(例如 IgG1、IgG2、IgG3)。如需使用二抗进行检测，应针对正确的亚类选择抗体。

　　优点：

　　制得的杂交瘤细胞为持续且可再生产的单克隆抗体来源，而且所有批次均相同，有助于提升实验过程和实验结果的一致性和标准化水平。

　　单克隆抗体只检测每个抗原上的一个表位，因此具有以下优点:

　　切片和细胞染色产生的背景信号更少。特异性地检测一个靶表位，不易与其它蛋白质发生交叉反应。

　　由于具有高特异性，单克隆抗体非常适于用作实验中的一抗，其产生的背景染色信号通常显著低于多克隆抗体。

　　缺点：

　　特异性过高，以致于无法进行跨物种的检测。

　　与多克隆抗体相比，更易受化学处理造成的抗原表位丢失的影响。这可通过合并靶抗原相同的两种或多种单克隆抗体进行补偿

　　相较于多克隆抗体，单克隆抗体的同质性非常高。在相同的实验条件下，单克隆抗体实验之间的结果重现性非常高。

　　得益于其高特异性，单克隆抗体能够在相关分子的混合物中极为高效地结合抗原。

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