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细胞株操作要点

时间:2017-11-22      阅读:503

细胞株操作方法及步骤:
操作步骤:
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
120ng/L5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
60ng/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
30ng/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
15ng/L 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
7.5ng/L1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
操作要点
1.仔细阅读说明书,确定胰岛素ELISA试剂盒在有效期内。按说明书确定所有试剂齐全,以及所有实验额外所需物品,如试管、吸头、移液器、离心机等。
2.标本制备要规范,每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备(贮存),尽量分装做备份。短期内无法实验者,注意低温保存。
3.按胰岛素ELISA试剂盒说明书将所用试剂平衡至室温,配制所需试剂。
4.选择抗体时选择一个单抗和一个多抗进行配对。若选择两个单抗,必须识别不同表位的抗体,从同一家公司选择抗体。
5.一般待测抗原标准曲线的线性范围的可通过将标准品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml到15pg/ml。可利用标准的Elsia操作流程、放大试剂盒、第三类试剂、或改变酶底物系统可在一定范围内提高灵敏度。
细胞株HUVSMC tRNA    人脐静脉平滑肌细胞总RNA    10 µg
HUASMC tRNA    人脐动脉平滑肌细胞总RNA    10 µg
HBMEC miRNA    人脑微血管内皮细胞微小RNA    1 µg
HBCSMC miRNA    人脑血管平滑肌细胞微小RNA    1 µg
HBVP miRNA    人脑血管周细胞微小RNA    1 µg
HCPEC miRNA    人脉络丛内皮细胞微小RNA    1 µg
HCPEpiC miRNA    人脉络丛上皮细胞微小RNA    1 µg
HCPF miRNA    人脉络丛成纤维细胞微小RNA    1 µg
HMC miRNA    人脑膜细胞微小RNA    1 µg
HN miRNA    人神经元微小RNA    1 µg
HCGC miRNA    人小脑颗粒细胞微小RNA    1 µg
HN-h miRNA    人海马趾神经元微小RNA    1 µg
HOPC miRNA    人少突胶质前体细胞微小RNA    1 µg
HOPC-os miRNA    人少突胶质前体细胞-悬浮生长微小RNA    1 µg
HSC miRNA    人雪旺细胞微小RNA    1 µg
HPC miRNA    人神经束膜细胞微小RNA    1 µg
HA miRNA    人星形胶质细胞微小RNA    1 µg
HA-c miRNA    人小脑星形胶质细胞微小RNA    1 µg
HA-sp miRNA    人脊髓星形胶质细胞微小RNA    1 µg
HA-h miRNA    人海马趾星形胶质细胞微小RNA    1 µg
HM miRNA    人小胶质细胞微小RNA    1 µg
HDMEC miRNA    人微血管内皮细胞微小RNA    1 µg
HDLEC miRNA    人淋巴管内皮细胞微小RNA    1 µg细胞株

 

 

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