原代细胞原理与含义
ELISA试剂盒和抗体在体外特异后呈现的各种景象,对样品中的抗原或抗体进行定性和定量检查。本试验选用双抗体夹心ABC-ELISA法,用抗小鼠TNF-a单抗包被于酶标板上,规范品和样品中的TNF-a与单抗,参加*化的抗小鼠TNF-a抗体,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶符号的链霉亲和素(Streptavidin)与*,参加酶底物邻苯二胺(OPD),呈现黄色,加停止液浓硫酸,色彩变深,在492nm处测OD值,TNF-a浓度与OD值成正比,可通过制作规范曲线求出标本中TNF-a浓度。它是样品中蛋白质含量检查的定性和定量方法。
操作程序为：
(1)载体膜的预处理及抗原包被 取硝酸纤维素膜用蒸馏水浸泡后，稍加单调进行压圈。将阴性、阳性抗原及被查看抗原适度稀释后参与圈中，置37℃使硝酸纤维素膜*单调。每张7cm×2.3cm的膜一般可点加40－53个样品，每个压圈可加抗原液1－20μl。
(2) 加酶标抗体，37℃反应一定时间后，用洗刷液洗三次。
(3)显色参与新鲜的底物液，37℃反应一定时间后，去掉底物液，加蒸馏水洗刷中止反应。
(4) 关闭 将硝酸纤维素膜置于关闭液中，37℃感作15－30分钟。关闭液多选用富含正常动物血清、pH7.2或pH7.4的PBS。
(5) 加被检血清 可直接在抗原圈上加，也可剪下抗原圈、置于微量板孔中，再参与一定量适度稀释的待检血清，37℃反应一定时间，用洗刷液洗三次，每次1－3分钟。洗刷液一般为一定浓度的PBS-Tween溶液。
(6) 效果判定 以阳性、阴恶血清作为对照，膜片基地出现深棕赤色斑斓者为阳性反应，否则为阴性反应。
原代细胞HPMSC tRNA    人肺间充质干细胞总RNA    10 µg
HMEpiC tRNA    人上皮细胞总RNA    10 µg
HMF tRNA    人成纤维细胞总RNA    10 µg
HUVEC tRNA    人脐静脉内皮细胞总RNA    10 µg
HUAEC tRNA    人脐动脉内皮细胞总RNA    10 µg
HUVSMC tRNA    人脐静脉平滑肌细胞总RNA    10 µg
HUASMC tRNA    人脐动脉平滑肌细胞总RNA    10 µg
HBMEC miRNA    人脑微血管内皮细胞微小RNA    1 µg
HBCSMC miRNA    人脑血管平滑肌细胞微小RNA    1 µg
HBVP miRNA    人脑血管周细胞微小RNA    1 µg
HCPEC miRNA    人脉络丛内皮细胞微小RNA    1 µg
HCPEpiC miRNA    人脉络丛上皮细胞微小RNA    1 µg
HCPF miRNA    人脉络丛成纤维细胞微小RNA    1 µg
HMC miRNA    人脑膜细胞微小RNA    1 µg
HN miRNA    人神经元微小RNA    1 µg
HCGC miRNA    人小脑颗粒细胞微小RNA    1 µg
HN-h miRNA    人海马趾神经元微小RNA    1 µg
HOPC miRNA    人少突胶质前体细胞微小RNA    1 µg
HOPC-os miRNA    人少突胶质前体细胞-悬浮生长微小RNA    1 µg
HSC miRNA    人雪旺细胞微小RNA    1 µg
HPC miRNA    人神经束膜细胞微小RNA    1 µg
HA miRNA    人星形胶质细胞微小RNA    1 µg
HA-c miRNA    人小脑星形胶质细胞微小RNA    1 µg
HA-sp miRNA    人脊髓星形胶质细胞微小RNA    1 µg
HA-h miRNA    人海马趾星形胶质细胞微小RNA    1 µg
HM miRNA    人小胶质细胞微小RNA    1 µg原代细胞