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原代细胞实验中过失的方法

时间:2017-11-01      阅读:205

原代细胞实验中过失的方法:
1、检验技师应具备从事实验室操作的基本素质和实践经验。
2、操作前仔细阅读说明书,严格按照说明书要求进行规范化操作。
3、评估试剂盒的实用性,试剂盒的稳定与否,对准确率的高低很重要。
4、加样要准确、快速。
5、使用校对过的微量移液器,排除自然误差。
6、严格掌握显色时间,显色时间过短,加入终止液反应终止后,底物结合物的量过少,易出现假阴性。
7、洗涤*,洗板不*,酶结合物本底显色会呈现假阳性。
8、严控反应时间,反应时间过长,酶失活,反应时间过短,酶结合物不能与血清中的微生物抗原抗体充分结合,生成物结构松散不牢固,容易洗掉,都可能造成假阴性。
实验过程必知小知识:
① 建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。
② 若显色过浅,可适当延长底物温育时。
③ 实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。
④ 酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。
⑤ 标本宜在新鲜时检测,如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应,保存过久可发生聚合在ELISA中可使本底加深。
⑥ 冻结标本溶解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠混合,不要在混匀器上强烈震荡。
⑦ 浑浊或有沉淀的标本应先离心或过滤,澄清后再检测。
⑧ 反复冻融会使蛋白效价降低,所以代测样本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。
原代细胞HK tRNA    人角膜细胞总RNA    10 µg
HRPEpiC tRNA    人视网膜色素上皮细胞总RNA    10 µg
HLEpiC tRNA    人晶状体上皮细胞总RNA    10 µg
HIPEpiC tRNA    人虹膜色素上皮细胞总RNA    10 µg
HConF tRNA    人结膜成纤维细胞总RNA    10 µg
HNPCEpiC tRNA    人无色素睫状上皮细胞总RNA    10 µg
HTMC tRNA    人小梁网细胞总RNA    10 µg
HAmEpiC tRNA    人羊膜上皮细胞总RNA    10 µg
HVT tRNA    人滋养层绒毛细胞总RNA    10 µg
HVMF tRNA    人绒毛间叶成纤维细胞总RNA    10 µg
HPA-v tRNA    人前脂肪细胞-内脏总RNA    10 µg
HPA-s tRNA    人前脂肪细胞-皮下总RNA    10 µg
HMSC-bm tRNA    人间充质干细胞-骨髓总RNA    10 µg
HMSC-ad tRNA    人间充质干细胞-脂肪总RNA    10 µg
HMSC-hp tRNA    人间充质干细胞-肝脏总RNA    10 µg
HUMSC tRNA    人脐带间充质干细胞总RNA    10 µg
HPMSC tRNA    人肺间充质干细胞总RNA    10 µg
HMEpiC tRNA    人上皮细胞总RNA    10 µg
HMF tRNA    人成纤维细胞总RNA    10 µg
HUVEC tRNA    人脐静脉内皮细胞总RNA    10 µg
HUAEC tRNA    人脐动脉内皮细胞总RNA    10 µg
HUVSMC tRNA    人脐静脉平滑肌细胞总RNA    10 µg
HUASMC tRNA    人脐动脉平滑肌细胞总RNA    10 µg
HBMEC miRNA    人脑微血管内皮细胞微小RNA    1 µg
HBCSMC miRNA    人脑血管平滑肌细胞微小RNA    1 µg
HBVP miRNA    人脑血管周细胞微小RNA    1 µg原代细胞

 

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