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细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)小鼠杂交瘤细胞;D7C5E2价格准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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产品描述:
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;D7C5E2价格
形态特性淋巴母细胞样
生长特性半贴壁生长
特征特性可产生单克隆抗体。
培养条件RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
传代方法1:3传代,2-3天传一代
传代情况C25
冻存条件基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测阴性
STR
同工酶
染色体
注意事项:
1.一般客户拿到小鼠杂交瘤细胞;D7C5E2价格后,应该注意什么?
客户收到细胞先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞时的培养基拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
细胞出现问题,不予以重发的情况有哪些?
(1)客户造成细胞污染,不重发;
(2)客户不正确操作致细胞状态不好,不重发;
(3)非推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发;
(4)细胞状态不好,未提供细胞培养前3天照片的,不重发;
(5)细胞培养时经其它处理的,不重发;
(6)细胞收到2天内,未告知,不重发;
(7)视具体情况而定。
CM-R031大鼠肠动脉内皮细胞*培养基100mL
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人卵巢微血管内皮细胞HOMEC
非洲绿猴肾细胞;VERO C1008 (E6) 中国仓鼠肺细胞,V79细胞 HCCC-9810(胆管细胞型肝癌细胞)
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY1008
CD27 Others Mouse 小鼠 CD27 / TNFRSF7 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠杂交瘤细胞;D7C5E2价格鸡血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人载脂蛋白A1(Apo-A1)抗体 免疫试剂盒 Human ai-apolipoprotein A1(Apo-A1)aibody ELISA Kit
酪酸蛋白激酶受体TYRO3(TYRO3)ELISA试剂盒 ,英文名: TYRO3 ELISA Kit
RatcomplemefactorH,CFHELISA试剂盒大鼠补体因子H(CFH)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanCyclin-dependekinase4,CDK-4ELISA试剂盒人周期素依赖性激酶4(CDK-4)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Humanglucoseoxidase,GODELISAKit人葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA试剂盒规格:96T/48T
冷冻保存细胞之方法:
小鼠杂交瘤细胞;D7C5E2价格冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。