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冷冻保存细胞之方法:
人成骨肉瘤细胞;MG-63培养冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
产品描述:
细胞名称 人成骨肉瘤细胞;MG-63培养
形态特性成纤维细胞
生长特性贴壁生长
特征特性用聚次核苷-聚胞嘧啶核苷酸和放线菌素D可以诱导产生高水平的干扰素。
培养条件MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)优质热灭活胎牛血清,10%
传代方法消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况PN5
冻存条件*培养基+8%DMSO
支原体检测阴性
STRAmelogenin:X,Y;CSF1PO:10,12;D13S317:11;D16S539:11;D18S51:16;D19S433:13,14;D21S11:30;D2S1338:17,24;D3S1358:15;D5S818:11,12;D7S820:10;D8S1179:13;FGA:21,25;TH01:9.3;TPOX:8,11;vWA:16,19
同工酶
染色体
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)人成骨肉瘤细胞;MG-63培养准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
注意事项:
1.一般客户拿到人成骨肉瘤细胞;MG-63培养后,应该注意什么?
客户收到细胞先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞时的培养基拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
细胞出现问题,不予以重发的情况有哪些?
(1)客户造成细胞污染,不重发;
(2)客户不正确操作致细胞状态不好,不重发;
(3)非推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发;
(4)细胞状态不好,未提供细胞培养前3天照片的,不重发;
(5)细胞培养时经其它处理的,不重发;
(6)细胞收到2天内,未告知,不重发;
(7)视具体情况而定。
*Anti-CNTF/FITC荧光素标记睫状神经营养因子抗体IgG规格:0.2ml
*Anti-CNTFRAlpha/FITC荧光素标记抗睫状神经营养因子受体α抗体IgG规格:0.2ml
*Anti-CollagenI/FITC荧光素标记抗I型胶原抗体IgG规格:0.2ml
*Anti-CollagenII/FITC荧光素标记抗Ⅱ型胶原抗体IgG规格:0.2ml
*Anti-CollagenIII/FITC荧光素标记抗Ⅲ型胶原抗体IgG规格:0.2ml
*Anti-CollagenIII/FITC荧光素标记抗Ⅲ型胶原抗体(CollagenⅢⅢ型胶原)IgG规格:0.2ml
*Anti-CollagenIV/FITC荧光素标记抗IV型胶原抗体IgG规格:0.2ml
*Anti-CollagenV/FITC荧光素标记抗Ⅴ型胶原抗体IgG规格:0.2ml
*Anti-CollagenVI/FITC荧光素标记抗Ⅵ型胶原抗体IgG规格:0.2ml
*Anti-CollagenVII/FITC荧光素标记抗Ⅶ胶原抗体(Ⅶ型胶原)抗体IgG规格:0.2ml
人成骨肉瘤细胞;MG-63培养*Anti-SSTR1生长抑素受体1抗体规格:0.2ml
*Anti-SSTR2生长抑素受体2抗体规格:0.2ml
*Anti-SSTR3生长抑素受体3抗体规格:0.2ml
*Anti-SSTR4生长抑素受体4抗体规格:0.1ml
*Anti-SSTR5生长抑素受体5抗体规格:0.2ml
*Anti-StAR/StARD1促黄体激素诱导蛋白抗体规格:0.2ml
*Anti-STAT1信号转导与转录激活因子1抗体规格:0.1ml
*Anti-phospho-STAT1(Tyr701)磷酸化信号转导与转录激活因子1抗体规格:0.1ml
*Anti-phospho-STAT1(Ser727)磷酸化信号转导与转录激活因子1抗体规格:0.1ml
*Anti-STAT2信号转导和转录激活因子2抗体规格:0.2ml
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