细胞：IPEC-J2细胞

中文名称：猪小肠上皮细胞

生长特性：贴壁

培养基：DMEM-H +10%FBS（GIBCO胎牛血清）

冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO

IPEC-J2细胞传代：

1）：细胞密度约80%时，吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加2~3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞（注意根据实际情况，把握消化时间）。

2）：镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时；

（可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处，即可肉眼可见细胞层脱落，或吹打后镜下观察吹打处，即消化完成，否则继续消化）

直接吸掉yi酶，加3~4ml 培养基，轻轻吹打细胞层，把细胞层吹落，吹散。

3）：取部分细胞悬液转移到新的培养皿中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。

4）：注意培养基PH值变化情况，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。

收到细胞后请尽快更换配套培养基，或自己配置的新鲜培养基（含15%血清），如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加10%的血清（原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时）。

（网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；）

自噬作用主要发挥为细胞清除损伤和毒性蛋白的作用。那些并没有罹患Ⅱ型糖尿病的机体，【人KMH-2 来源：通派细胞库 人甲状腺未分化癌细胞】自噬作用可以预防IAPP毒性蛋白的累积;而罹患Ⅱ型糖尿病的病患，这一过程没有正常工作，反而发挥破坏β细胞的作用。

而β细胞分泌的胰岛素在维持血糖健康方面起重要作用。此前已有少量研究揭示过自噬作用对于β细胞功能的发挥和存活相当重要，【人IMR-90 来源：通派细胞库 人胚肺成纤维细胞】但是并没有揭示这一过程对于导致Ⅱ型糖尿病的淀粉样蛋白的调节作用。

此次研究利用三个实验模型，分别是胰腺β细胞，【人SK-MEL-5 来源：通派细胞库 人皮肤恶性黑色素瘤细胞】表达人类IAPP的小鼠中分离出的胰岛细胞，人类胰岛。研究发现，自噬作用从胰腺β细胞清除IAPP过程中发挥重要作用。

为了证实这一发现，研究人员构建了一个新型小鼠模型，【人Malme-3M 来源：通派细胞库 人皮肤恶性黑色素瘤细胞】该小鼠β细胞的自噬作用缺失，且还能表达人类胰岛淀粉样多肽。研究人员发现该小鼠毒性蛋白IAPP水平升高，这导致了β细胞的死亡。结果，这些小鼠进一步发展成糖尿病。

除以上研究发现，此次研究再次证实Ⅱ型糖尿病和阿尔茨海默病，【人SK-MEL-2 来源：通派细胞库 人皮肤恶性黑色素瘤细胞】以及其他因毒性淀粉样蛋白的累积为标志的神经退行性疾病之间存在类似性。自噬作用同样在这些疾病过程中发挥重要作用。

此次研究旨在研究β细胞受损的细胞机制，【小鼠NE-4C 来源：通派细胞库 小鼠神经干细胞】以便确定β细胞保护的靶点。此次发现有助于开发新一代治疗Ⅱ型糖尿病方法。