AAT酰基转移酶检测试剂盒微量法

商品介绍：

测定意义

AAT是一个多功能蛋白大家族，主要负责催化生物体内各种酰基化和去酰基化反应，在基因表达、代谢和信号传导中具有重要作用。

测定原理：

AAT催化乙酰CoA转移乙酰基到丁醇，释放的CoA还原DTNB生成TNB；TNB在412nm有吸收峰，测定412 nm吸光度增加速率可计算AAT活性。

自备仪器和用品：

研钵、冰、台式离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅。
产品属性：

产品内容：

酸性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；

碱性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；

试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；

试剂二：液体 1.5mL×1 支，4℃保存

试剂三：粉剂×1 支，-20℃保存，用时加入 1.6mL 双蒸水，混匀，4℃保存一周；

试剂四：粉剂×1 支，4 ℃保存，用时加入 1.9mL 双蒸水，混匀，4℃保存一周；

试剂五：液体 0.7mL×1 支，4 ℃保存；

试剂六：液体 10mL×1 瓶，4 ℃保存；

试剂七：自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。

NAD 标准品：粉剂×1 支，-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水，即 2umol/mL，将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。

NADH 标准品：粉剂×1 支，-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水，即 2umol/mL，将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。

操作步骤：

一、NAD+和 NADH 的提取：

1、血清（浆）中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：取 0.1mL 血清（浆），加入 0.5mL 酸性提取液，煮沸 5min (盖紧，以防止水分 散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min；取上清 200uL，加入等体积碱性提取液；混匀，10000g 4℃离心 10min，取上清，冰上保存待测。

NADH 的提取：取 0.1mL 血清（浆），加入 0.5mL 碱性提取液，煮沸 5min(盖紧，以防止水分 散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积酸性提取液；混匀，10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。

2、组织中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：称取约 0.1g 组织，加入 0.5mL 酸性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(盖紧，以防 止水分散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积碱性提取液混匀， 10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。

NADH 的提取：称取约 0.1g 组织，加入 0.5mL 碱性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(盖紧，以防 止水分散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积酸性提取液混匀， 10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。

3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：收集 500 万细胞或细菌，加入 0.5mL 酸性提取液，超声波破碎 1min（强度 20％ 或 200W，超声 2s，停 1s），煮沸 5min(盖紧，以防止水分散失)，冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min，取上清液 200uL 另一新的离心管中，加入等体积的碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4℃ 离心 10min，取上清,冰上保存待测。

NADH 的提取：收集 500 万细胞或细菌，加入 0.5mL 碱性提取液，超声波破碎 1min（强度 20％ 或 200W，超声 2s，停 1s），煮沸 5min(盖紧，以防止水分散失)，冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min，取上清液 200uL 另一新的离心管中，加入等体积的酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4℃ 离心 10min，取上清,冰上保存待测。

注意事项：

1、公司产品仅用于科研操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加，必须分开加。

2、反应过程要注意避光。

3、当吸光值大于 1 时，建议稀释后测量，计算公式中应当乘以稀释倍数。

下列是公司正在热销的产品：

紫色直丝链霉Sheep CG (Chorionic Gonadotropin) ELISA Kit

秀珍菇Sheep IL-24 (Interleukin 24) ELISA Kit

节杆属Sheep AP (Allopregnanolone) ELISA Kit

香菇Sheep AQP-2 (Aquaporin 2) ELISA Kit

中国汉纳酵母Sheep COL3 (Collagen Type Ⅲ) ELISA Kit

黑曲霉Sheep ApoA5 (Apolipoprotein A5) ELISA Kit

干酪乳杆Sheep ACCPA (anti-cyclic citrullinated peptide antibody) ELISA Kit

卤水糖螺Sheep Ta1 (Thymosin-α1) ELISA Kit

汉逊德巴利酵母Sheep PS1 (Presenilin 1) ELISA Kit

钟器腐霉Sheep PACAP-38 (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 38) ELISA Kit

柑橘青霉Sheep PACAP-27 (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 27) ELISA Kit

北京芽孢杆Sheep NOS2/iNOS (Nitric Oxide Synthase 2, Inducible) ELISA Kit

黑根霉Sheep IL-5 (Interleukin 5) ELISA Kit

欧文氏属GHRL (Ghrelin) ELISA Kit

固氮GHRL (Ghrelin/Obestatin Preprohormone) ELISA Kit
AAT酰基转移酶检测试剂盒微量法乙 for HPLC, >99.0%(GC)，含2%乙作稳定剂气相纳米二氧化硅 99.8%,比表面积（BET）：200m2/g;氯化物：0.01Anti-IFN- Beta/FITC  荧光标记抗人干扰-β抗IgG

二甲基黄 indicator气相纳米二氧化硅 99.8%,比表面积（BET）：300m2/g；粒径：7-40nAnti-IFN- Gamma/FITC  荧光标记干扰-γ抗体IgG

砷试剂 AR,99.0%气相纳米二氧化硅 99.8%,比表面积（BET）：170m2/g；粒径：7-40nAnti-IFN- Gamma/FITC(Interferon Gamma)  荧光标记抗大、小鼠IFN-γ抗IgG

* standard for GC,>99.9%(GC)气相纳米二氧化硅 99.8%,比表面积（BET）：120m2/g；粒径：7-40nAnti-IFNGR2/FITC  荧光标记干扰-gamma受体2抗体IgG

1,3-二基－4-(5-溴-2-吡偶氮) AR疏水气相纳米二氧化硅 99.8%,比表面积(BET):230m2/g;;粒径:7-40nAnti-IFN- Gamma/HRP  辣根过氧化物标记鼠抗人干扰-γ/IFN-gamma单克隆抗体IgG

2-(3,5-二溴-2-吡偶氮)-5-二乙基 AR气相纳米二氧化硅 99.8%,比表面积（BET）：100m2/g；粒径：7-40nAnti-IFNGR1/CD119/FITC  荧光标记干扰-gamma受体抗体IgG

二乙基乙基纤维-1 TLC二氧化硅 99.5%,30±5nmAnti-IGC/FITC  荧光标记兔抗非洲爪蟾IGC抗体IgG

二甲基黄 分析标准品，≥98.0% (HPLC)二氧化硅 99.5%,15±5nmAnti-IGF-I/FITC  荧光标记标记胰岛样生长因子-I抗体IgG