智慧城市网

登录

入了ELISA的门 这些技术点你得知道

研域(上海)化学试剂有限公司

2014/12/29 11:04:52>> 进入商铺
  为了得到更好的实验结果,一些ELISA试剂盒实验新手们还需多加了解技术内容,公司每周都会为您精心整理出重点技术要领,能够熟练的掌握好这些之后再应用到实验里面就会简单的多。今天的主要内容是入了ELISA的门,这些技术点你得知道。
  
  样本加样方法
  
  1、细胞上清:前处理必须是细胞离心去除,每孔直接加100μl即可。如果浓度太高需稀释时,用标准品稀释液直接稀释。
  
  2、脑脊液:前处理必须是细胞离心去除,每孔直接加100μl即可。如果浓度太高需稀释时,用标准品稀释液直接稀释。
  
  3、血清血浆:请加入50ul样本分析缓冲液后加50ul标本,如稀释量大,请将样本与样本分析缓冲液等量加入,不足部分用标准品稀释液补充至100ul。
  
  A.血清标本应是自然凝固后,取上清,避免在冰箱中凝固血液;
  
  B.血浆标本,推荐用EDTA的方法收集若待测样本不能及时检测,标本收集后请分装,冻存于-20℃,避免反复冻融。
  
  C.血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂;
  
  D.标本应清澈透明,检测前样本中如有悬浮物应通过离心去除。
  
  E.请勿使用溶血,高血脂或污染的标本检测,否则结果将不准确。
  
  4、组织匀浆液的样本,要制备过程中需要在缓冲液中加入蛋白酶抑制剂,防止蛋白成份被内源性蛋白酶降解,造成检测结果的值偏低。
  
  因组织匀浆液的样本蛋白种类多,含量丰富,实验参照血清血浆标本的处理方法进行,否则就会影响实验结果。具体是加入50ul样本分析缓冲液后加50ul标本,需稀释时,请将样本与样本分析缓冲液等量加入,不足部分用标准品稀释液补充至100ul。
  
  因为目标蛋白不同,可能造成降解的蛋白类型可能不一样,如果实验前通过文献确定用哪种蛋白酶抑制剂,有针对性加入,可节省抑制剂。如果查不到相关文献,可采用组合抑制的办法确保蛋白不易被降解。

相关技术文章:

您的留言已提交成功~

采购或询价产品,请直接拨打电话联系

联系人:杨经理

联系方式:
当前客户在线交流已关闭
请电话联系他 :