晶抗生物牛ELISA试剂盒的基本操作步骤如下
今天为大家讲述晶抗生物牛ELISA试剂盒的基本操作步骤如下
准备工作：
试剂准备：从冷藏环境中取出试剂盒，室温（20-25℃）放置 30 分钟左右，让试剂恢复到室温。同时按照说明书的要求准备好各种试剂，如洗涤液可能需要进行稀释等。
样本准备：采集的牛血清、血浆或其他相关液体样本，按照规定的方法进行处理和保存。例如，血清样本可于室温放置 2 小时或 4℃过夜后于 1000xg 离心 20 分钟，取上清液用于检测；血浆样本可用 EDTA 或肝素作为抗凝剂，标本采集后 30 分钟内于 2-8℃、1000xg 离心 15 分钟，取上清液备用。
加样：
分组：取出 96 孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组（一般有 6 个浓度梯度）、空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂）、待测样品组。为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。
加样操作：依照标准品的顺序分别加入适量的标准品溶液于空白微孔中，空白对照孔加入等量的蒸馏水或相应的空白对照液，其余微孔中加入处理好的待测样本。加样时应将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
温育：
用封板膜封板后，将酶标板放入湿盒内，根据试剂盒说明书的要求在特定温度（通常为 37℃）下恒温孵育一定的时间（一般为 1 小时左右，但不同的试剂盒可能有不同的要求）。在温育过程中，要确保温度的准确性和稳定性，避免温度波动对实验结果造成影响。
洗涤：
小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干。每孔加满洗涤液，静置 15-30 秒后弃去，如此重复多次（一般为 5 次），最后用吸水纸拍干。洗涤过程要充分，以确保去除未结合的物质，避免对后续的检测产生干扰，但也要注意避免过度洗涤导致样本损失。
加酶标溶液：
除空白对照孔外，向标准品组和待测样本组的各孔中加入适量的酶标溶液。加酶标溶液时要注意操作的准确性，避免加样误差。
再次温育：同第 3 步的温育操作，再次进行温育，使酶标溶液与样品充分反应。
显色：
各孔加入显色剂 A 液，再加入显色剂 B 液，轻轻震荡混匀。然后在特定温度（如 25-37℃）下避光反应一定时间（一般为 10-15 分钟），此时孔内的颜色会发生变化。
终止反应：
加入终止液，终止反应（此时颜色通常会由蓝色立转黄色）。终止液的加入量要准确，并且要迅速、均匀地加入，以确保反应能够及时终止。
读板：使用酶标仪在特定波长（一般为 450nm）下读取各孔的吸光度（OD 值）。
结果分析：根据标准品的 OD 值绘制标准曲线，然后根据待测样品的 OD 值在标准曲线上查出相应的浓度，再乘以稀释倍数（如果在加样前对样品进行了稀释），即为样品的实际浓度。
上海晶抗生物一直致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供的牛ELISA试剂盒科研试剂和完善的技术服务，满足生物化学、分子生物学、细胞生物学、免疫学等生物科技实验需求。