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人骨肉瘤细胞传代 143B细胞

发布时间:2024/9/6 9:33:21
浏览次数:37

细胞:143B细胞

中文名称:人骨肉瘤细胞

生长特性:贴壁细胞

培养基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)

冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO

收到细胞后请尽快更换配套培养基,或自己配置的新鲜培养基(含15%血清),如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时)。

143B细胞传代:

1):细胞密度约80%时,吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2~3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞(注意根据实际情况,把握消化时间)。

2):镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时;

(可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处,即可肉眼可见细胞层脱落,或吹打后镜下观察吹打处,即消化完成,否则继续消化)

直接吸掉yi酶,加3~4ml 培养基,轻轻吹打细胞层,把细胞层吹落,吹散。

3):取部分细胞悬液转移到新的培养皿中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。

4):注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。638549558799799666978.jpg

(网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;)

除了裂开XBP1,IRE1α能够在一个名为调节IRE1α缺陷衰败(RIDD)的过程中劈开其他mRNA基底。

【人H716细胞 来源:通派细胞库 人结直肠腺癌细胞】

XBP1缺陷在CD8α+ cDCs的RIDD中导致了一种补偿性的增长,并且这被指出对CD11c的较低水平表达,以及CD8α+ cDCs的交叉递呈缺陷负有责任。这些数据表明,IRE1α–XBP1轴调节了CD8α+ cDCs在稳态中的表型及交叉递呈功能。

RE1α–XBP1轴在浆细胞存活中扮演的角色。XBP1被发现能够导致诱导型一氧化氮合酶(iNOS;被NOS2所编码)的合成,并且在几种不同的试验系统中,iNOS缺陷并没有影响浆细胞发育,但大大牵扯到新产生浆细胞的存活。【KG-1细胞 来源:通派细胞库 急性骨髓性白血病细胞】

白介素-6(IL-6)和APRIL(一种增殖诱导配体)在骨髓中向浆细胞提供了存活信号,但NOS2–/–浆细胞却不能对这些存活因子做出响应。

这表明,iNOS在一些浆细胞存活路径中是一个中间物。与此一致的是,IL-6被发现在野生型浆细胞中诱导了NOS2转录。

更进一步的研究表明,iNOS对浆细胞存活的积极效应包括通过一个依赖于一氧化氮、可溶的鸟苷酸环化酶和环磷鸟苷GMP(cGMP)的路径激活蛋白激酶G(PKG)。

此外,NOS2–/–浆细胞存活的匮乏与较低水平的Xbp1表达以及在mRNA水平的其他UPR成分,以及增强的胱门蛋白酶活化有关。这两种效应都被指出与PKG活化有关。

因此,新产生的浆细胞的存活与由iNOS导致的一个可溶的鸟苷酸环化酶–cGMP–PKG路径的激活有关,而iNOS调节了UPR,并抑制了胱门蛋白酶活化。

【人A875细胞 来源:通派细胞库 人黑色素瘤细胞】【人HS-746T细胞 来源:通派细胞库 人胃癌细胞系】

总的来看,这些研究展现了UPR的成分如何是保持cDCs和浆细胞的自我平衡功能所必须的。

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