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人胶质瘤细胞传代 (U118MG细胞)

发布时间:2024/9/5 8:49:46
浏览次数:34

细胞:U118MG细胞

中文名称:人胶质瘤细胞

生长特性:贴壁细胞

U118MG细胞培养基:1640 培养基  血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)

冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO

收到细胞后请尽快更换配套培养基,或自己配置的新鲜培养基(含15%血清),如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时)。

U118MG细胞传代:

1):细胞密度约80%时,吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2~3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞(注意根据实际情况,把握消化时间)。

2):镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时;

(可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处,即可肉眼可见细胞层脱落,或吹打后镜下观察吹打处,即消化完成,否则继续消化)

直接吸掉yi酶,加3~4ml 培养基,轻轻吹打细胞层,把细胞层吹落,吹散。

3):取部分细胞悬液转移到新的培养皿中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。

4):注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。细胞株.jpg


(网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;)

土壤中的硝酸盐(植物生长的一种主要营养物)水平可以相差巨大。因此植物需要一个多功能机制来从环境中获取硝酸盐。

(人SK-N-SH细胞  来源:通派细胞库 人神经母细胞瘤细胞)

质子偶联转运分子NRT1/PTR家族通过肽的摄取同化真核生物和细菌的氮元素。然而,这个家族的大部分成员在植物中已经进化到可转运硝态氮,甚至能够运送额外的次级代谢物和激素。

(人SK-HEP-1细胞 来源:通派细胞库 人肝腹水腺癌细胞)

在模型植物拟南芥中,双亲和性转运分子NRT1.1能吸收一系列不同浓度的硝酸盐,根据一个关键的苏an酸残基的磷酸化状态从低亲和性模式向高亲和性模式切换。

(人SK-NEP-1细胞 来源:通派细胞库 人肾母细胞瘤细胞)

以前的研究已经发现拟南芥NRT1.1作为双亲和性转运分子,它可能会在一个波动很大的一个浓度范围内转运硝酸盐。NRT1.1的作用方式是通过磷酸化的关键残基——苏an酸101控制。但目前仍不清楚这一翻译后修饰开关是如何切换NRT1.1的两种亲和状态的。

(人MDA-MB-435S细胞 来源:通派细胞库 人乳癌细胞)

现在研究人员获得了未磷酸化的NRT1.1的晶体结构,在面向内的构象中发现了一个出人意外的同型二聚体。利用基于细胞的荧光共振能量转移技术;

(人M14细胞 来源:通派细胞库 人黑色素瘤细胞)

研究证实功能性的NRT1.1在细胞膜中二聚化,Thr 101拟磷酸化突变通过将这一二聚体解偶联,使得这一蛋白转换为单相高亲和性转运蛋白。结合底物转运通道分析,研究结果证实这一磷酸化作用控制的二聚化开关使得NRT1.1能够以两种不同的亲和模式来吸收硝酸盐。

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