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　　培养基倾注温度小常识

　　1、培养基的倾注适宜温度约45℃。培养基放置于手心感觉不烫，但是放置于手背感觉烫时，培养基温度大约就是45℃。培养基倾注时温度太高的话，凝固时间较长，另外皿盖上会有大量冷凝水，不利于后续实验。温度太低则容易出现倒板过程中瓶中培养基部分凝固的现象。

　　2、有些培养基需要加入添加成分，这些添加成分在加入前应先放置到室温，避免冷的液体造成琼脂凝结或形成片状物。

　　3、目前多数实验室培养基灭菌后会放置水浴或者烘箱中，需使用的时候拿出来直接倒板。但培养基静置时间不宜过长，静置时间一般不超过4小时。静置时间过长，培养基中琼脂可能会少量凝固，形成类似絮状析出。

　　4、在实验过程中不可避免因特殊情况而导致未倒板培养基已凝固，凝固后培养基可重新加热溶解。一般来说沸水浴或者电磁炉加热，不能重新再灭一次菌。

　　培养基的倾倒方法主要涉及以下几个步骤：

　　1.温度调节。培养基倾注的适宜温度大约为45℃。如果温度过高，会导致凝固时间延长，且皿盖上会有大量冷凝水，不利于后续实验。如果温度过低，则可能导致倒板过程中瓶中培养基部分凝固。

　　2.添加成分。如果培养基需要加入添加成分，这些成分在加入前应先放置到室温，以避免冷的液体造成琼脂凝结或形成片状物。

　　3.静置时间。培养基灭菌后应放置在水浴或烘箱中，使用前拿出直接倒板。培养基的静置时间不宜过长，一般不超过4小时，以避免琼脂少量凝固。

　　4.平板准备。倒皿前，平皿应保持在35℃~40℃的温度。如果需要表面接种，有冷凝水的平板表面容易产生蔓延菌落。这时可放在有对流的无菌净化台中吹干培养基表面，但不能过度干燥，否则培养过程中平板容易开裂。

　　5.倾注量。平板倾注量一般在18~20mL左右，如果培养时间超过48小时或培养温度高于40℃，为防止水分过量蒸发导致平板开裂，倾注量一般为25mL左右。

　　6.避免气泡。倒平板时尽量贴着平皿壁缓慢倒入，将气泡留在瓶子底部。如果平板中有少量气泡的话，可以把气泡轻摇到平板壁上，这样不会影响结果观察。

　　7.混合均匀。每个平板中加入10mL融化的琼脂培养基并迅速往复摇动和转圈晃动5~15次使培养基与接种物充分混合。

　　8.培养。待平板冷却后翻转并置于适当的温度下培养。

　　在整个操作过程中，需要注意避免污染，使用前需将装有培养基的瓶子或试管弄松，然后放在滚水或蒸汽浴里进行溶解，要小心避免培养基过热变质。已消毒培养皿的数量要比所测样品的数量多一个做空白对照。