Meth-A细胞培养（小鼠肉瘤细胞）
- 发布时间：2024/5/11 8:06:47
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细胞：Meth-A细胞
中文名称：小鼠肉瘤细胞
生长特性：贴壁
培养基：1640 培养基 血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）
冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO
收到细胞后请尽快更换配套培养基，或自己配置的新鲜培养基（含15%血清），如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加10%的血清（原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时）。
Meth-A细胞传代：
1）：细胞密度约80%时，吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加2~3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞（注意根据实际情况，把握消化时间）。
2）：镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时；
（可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处，即可肉眼可见细胞层脱落，或吹打后镜下观察吹打处，即消化完成，否则继续消化）
直接吸掉yi酶，加3~4ml 培养基，轻轻吹打细胞层，把细胞层吹落，吹散。
3）：取部分细胞悬液转移到新的培养皿中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。
4）：注意培养基PH值变化情况，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。
（网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；）
古典猪瘟病毒(CSFV)核酸扩增检测
实验标本：适用标本类型：猪血清、肺、脾、肾、肠系膜及额下淋巴结等组织标本或病毒培养液等。
标本采集：猪肺、脾、肾、肠系膜及额下淋巴结等组织：采集可疑病死猪或扑杀病猪疑似组织约1g左右，置入1.5ml洁净EP管，立即送检。
血清： 用一次性无菌注射器抽取受检猪耳静脉或者前腔静脉静脉血2-5ml，静置斜放待血清析出， 1,0000rpm离心3分钟，可取上清立即用于测试；
或吸取上部血清(约500µl)转入无菌1.5ml Eppendoff管，立即送检。
标本保存和运输：上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃。但不能超过6个月，标本运送应采用0℃冰壶。
结果分析判定：
反应结束后，使用手动调整阈值使阴性质控品Ct 值在40以上，Ct值小于38个循环的为阳性；Ct值在38-40个循环之间，为灰区，需要进行重复试验。重复试验之后，如果Ct值仍然在38-40个循环之间，判断为阳性，没有荧光值增长为阴性。
【质控标准】
阴性质控品：没有荧光值增长，全部阴性。
CSFV-阳性质控品：阳性质控品的 Ct 值均应小于30.0。
以上条件应同时满足 ，否则，此次试验视为无效，全部试验应重新进行。