古朵课堂：细胞培养的基本条件
古朵课堂：细胞培养的基本条件
细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响.细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘.细胞培养工作包括:工作液配制、无菌操作(采样)、温育、无菌处理,细胞和用品贮存等.细胞培养室的设计实施原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封闭培养于一室,而洗刷消毒在另一室.
一、常用设施及设备:
(1)超净工作台:也称净化工作台,分为侧流式、直流式和外流式三大类.
(2)无菌操作间:一般由更衣间、缓部间和操作间三部分组成.操作间放置净化工作台及二氧化碳培养箱、离心机、倒置显微镜等.缓冲间可放置电冰箱、冷藏器及消毒好的无菌物品等.
(3)操作间:普通培养箱、离心机、水浴锅、定时钟、普通天平及日常分析处理物品.
(4)洗刷消毒间:烤箱、消毒锅、蒸馏水处理器及酸缸等.
(5)分析间:显微镜、计算机及打印机等.
二、培养器皿:
细胞培养以玻璃器皿为主,常准备zui需是使用zui的三倍.器皿应选择透明度好、无毒、中性硬度玻璃制品.常用的玻璃器皿有下面几种.
(1)液体储存瓶:用于储存各种配制好的培养液、血清等液体,常以500ml、250ml、100ml生理盐水瓶或血浆瓶代替.
(2)培养瓶:根据培养细胞种类要求不同培养瓶的形态各异,用于细胞传代培养的细胞要求瓶壁厚簿均匀,便于细胞贴壁生长和观察,瓶口要大小一致,口径一般不小于1cm,允许吸管伸入瓶内任何部位,规格有200ml、100ml、50ml、25ml、10ml等几种.用于外周血培养的常用10ml普通圆瓶.两种培养瓶均要求选用玻璃制成.
(3)培养皿:用于开放式培养及其它用途.分直径30mm、60mm、120mm等几种.
(4)吸管:常用的有长吸管和短吸管两类,长吸管也称刻度吸管.其改良后管上部有球型刻度称改良吸管,刻度吸管用于移动液体.常用1ml和10ml两种.短吸管也叫滴管,分弯头和直头两种.
(5)离心管:离心管是细胞培养中使用zui广泛的器皿,根据用途不同形态各样,常用于细胞培养的离心管有大腹式尖底离心管和普通尖底离心管两类.前者分别为50ml、30ml、15ml;后者则多为10ml和5ml.
(6)其它:如三角烧瓶、烧杯、量筒、漏斗、注射器等.
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