智慧城市网

登录

48T兔(Rabbit)S100-βELISA 试剂盒

研域(上海)化学试剂有限公司

2012/6/25 17:25:02>> 进入商铺

兔(Rabbit)S100-βELISA 试剂盒

研域(上海)化学试剂有限公司国产elisa试剂盒做的确实不错的,该公司导师一般都认可的,其实和进口的没什么区别的,而且操作比较简单.

研域(上海)化学试剂有限公司自研究所改制以来在分子生物学试剂盒、荧光定量PCR、siRNA载体构建、全基因合成拼接、荧光探针修饰、多肽合成、dNTP、Pfu酶、热启动Taq酶、DNA marker、基因工程、原生质体的培养、细胞融合、单克隆抗体诊断试剂等研究方向作了深入的研究。

      它是一家技术服务型渠道企业,在行业发展中所承担的角色是一种沟通产出方和需求方(科研和市场)的媒介,我们致力为行业人才提供了包括科研在内的更多出口,为科研提供了有力的硬件支持,有效地促进科研和市场需求结合,提高了科研成果的转化效率,使得科研更具活力。目前国家对于生物行业的发展给予了极大的重视,但更多地侧重于科研的投入,行业内缺乏*的技术服务体系和渠道支撑... 研域(上海)化学试剂有限公司

本试剂仅供研究使用  标本:血清或血浆

兔(Rabbit)S100-βELISA 试剂盒

试验原理:
    S100-β试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知S100-β浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将S100-β和*标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中S100-β的浓度呈比例关系。
 

兔(Rabbit)S100-βELISA 试剂盒

    
试剂盒内容及其配制
试剂盒成份(2-8℃保存) 96孔配置 48孔配置 配制
96/48人份酶标板 1块板(96T) 半块板(48T) 即用型
塑料膜板盖 1块 半块 即用型
标准品:40ng/ml 1瓶(0.6ml) 1瓶(0.3ml) 按说明书进行稀稀
空白对照 1瓶(1.0ml) 1瓶(0.5ml) 即用型
标准品稀释缓冲液 1瓶(5ml) 1瓶(2.5ml) 即用型
*标记的抗S100-β抗体 1瓶(6ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
亲和链酶素-HRP 1瓶(10ml) 1瓶(5.0ml) 即用型
洗涤缓冲液 1瓶(20ml) 1瓶(10ml) 按说明书进行稀释
底物A 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
底物B 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
终止液 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型

自备材料
蒸馏水。
加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
振荡器及磁力搅拌器等。

安全性
避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

操作注意事项
试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

样品收集、处理及保存方法
血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

试剂的准备
标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:
40 ng/ml (6号标准品) 原倍浓度不用稀释直接加入50ul。
20 ng/ml (5号标准品) 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液
10 ng/ml (4号标准品) 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液
5.0 ng/ml (3号标准品) 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液
2.5 ng/ml (2号标准品) 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液
1.25 ng/ml (1号标准品) 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液
0 ng/ml (空白对照) 原始浓度不用稀释直接加入50ul。

洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。

操作步骤
使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的*标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
在450nm波长处测定各孔的OD值。

建议使用的实验方案
 标准品浓度(ng/ml) 
A 40 40 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
B 20 20 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
C 10 10 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
D 5.0 5.0 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
E 2.5 2.5 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
F 1.25 1.25 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
G 0 0 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
H 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品


局限
6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到的结果。

试剂盒性能
1. 灵敏度:zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。

结 果 判 断 与 分 析
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的S100-β标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的S100-β含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

3、检测值范围:0-40ng/ml

4、敏感度: 0.1 ng/ml

N0329-1g Nitrotetrazolium blue chloride 氯化硝基四氮唑蓝 [298-83-9] 1g
N6391-10mg Nocodazole 诺考达唑 [31430-18-9] 10mg
N6692-10mg Nonactin from Streptomyces griseusvar griseus 无活性菌素 [6833-84-7] 10mg
N6823-5g 1-Nonanesulfonic acid sodium salt 壬烷磺酸钠 [35192-74-6] 5g
NB0669-250g NON-Fat Powdered Milk 脱脂奶粉 / 250g
N542422-100g NON-Fat Powdered Milk with EDTA & ampicillin 含EDTA 和氨苄*无脂肪奶粉 / 100g
NDB0385-100ml Nonidet® P-40 (NP-40) 诺纳德® P-40 [9016-45-9] 100ml
NDB0385-500ml Nonidet® P-40 (NP-40) 诺纳德® P-40 [9016-45-9] 500ml
 

相关技术文章:

您的留言已提交成功~

采购或询价产品,请直接拨打电话联系

联系人:杨经理

联系方式:
当前客户在线交流已关闭
请电话联系他 :