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elisa检测试剂盒试验步骤

发布时间:2017/11/8 10:07:25
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elisa检测试剂盒试验步骤:
1)将两种显色底物1:1等体积混合(一般各1ml/membrane)。
2)将混合物覆盖在膜表面,1-2分钟,摇晃使均匀。
3)用保鲜膜把膜包起来,放入夹板中。
4)在暗室中将X光片,覆盖在膜的上面,夹好夹子,曝光1min。
5)显影、定影。
6)根据结果调整曝光时间和曝光区域,得到结果。
注意:荧光在一段时间后会越来越弱。ELISA试剂盒
记得全程手套操作,一则避免手印污染影响结果,二则保护自己(未交联的丙烯酰胺、甲醛等等虽不立即致命但都会慢慢毒害你的身体)
1.   如果WB前没有可参考的资料--比如不知道是否有表达,比如抗体少还要摸条件(稀释度),可以用剪膜剩下的边角料来先做几组点杂交摸条件,省点时间省点试剂;
2.  去掉积层胶后,预染的Marker可用以识别胶上下方向和膜的正反面(预染Marker如果照着说明书用量,有可能在电泳时看不到条带,但转膜时有浓缩效应而且背景白就可以看到了。如果要电泳能看到就要参考电泳的那个用量,或者多加1-2倍的量);如果目标蛋白小,指示剂也可以指示方向,但是如果蛋白大,指示剂已经跑出去了,就要留意分清胶上下方向,切个小角是常用的方法。膜和滤纸一起裁(不过滤纸上下叠多了膜不好剪,硝纤膜容易裂,用利刀+尺子+垫厚报纸划比较容易)尽量和胶一样大小,胶用纯水冲洗一下后用电泳缓冲液平衡过再量。我自己通常剪的时候会故意长宽各比胶少1mm,保证膜和胶不会碰到对方背后的滤纸就好。
3.  对于特别小的蛋白,tricine SDS-PAGE电泳有助于提高蛋白大小在1KD-20KD间的分辨率,不用*,丙烯酰胺的浓度也不用太高(可参考2004年中国生物工程杂志上有一篇文章(有效分离1kD小肽的Tricine-SDS-PAGE方法)
4.  转膜前胶要在转移缓冲液里平衡一下防止胶变形,也有助于进一步去掉可能有碍转膜的杂质。还有人在这一步浸泡帮助蛋白复性,可以直接在胶上检测蛋白活性。、
elisa检测试剂盒人转化生长因子β3(TGF-β3)免疫试剂盒    Human Transforming Growth factor β3,TGF-β3 ELISA kit
人转化生长因子β2(TGFβ2)免疫试剂盒    Human TGF β2 ELISA Kit
人转化生长因子β1(TGF-β1)免疫试剂盒    Human TGF-β1 ELISA kit
人转化生长因子α(TGF-α)免疫试剂盒    Human TGF-α ELISA Kit
人转*酶2C多肽(TGM2)免疫试剂盒    human transglutaminase 2C polypeptide,TGM2 ELISA Kit
人主要组织相容性复合体,II类,DQα2(HLA-DQA2)免疫试剂盒    Human HLA-DQA2 ELISA Kit
人周期素依赖性激酶5(CDK5)免疫试剂盒    Human Cyclin Dependent Kinase 5,CDK5 ELISA Kit
人周期素依赖性激酶4(CDK-4)免疫试剂盒    Human Cyclin-dependent kinase 4,CDK-4 ELISA Kit
人肿瘤相关抗原(TAA)免疫试剂盒    Human tumor-associated antigen,TAA ELISA Kit
人肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)免疫试剂盒    Human Tumor Specific Growth Facter/tumor supplied group of factor,TSGF ELISA Kit
人肿瘤坏死因子诱导基因6蛋白(TNFAIP6)免疫试剂盒    Human TNFAIP6 ELISA Kit
人肿瘤坏死因子相关激活诱导因子(TRANCE)免疫试剂盒    Human TNF related activation induced cytokine,TRANCE ELISA Kit
人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体3(TRAIL-R3)免疫试剂盒    Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand receptor 3,TRAIL-R3 ELISA Kit
人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体2(TRAIL-R2/DR5)免疫试剂盒    Human TRAIL-R2 ELISA Kit
人肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)免疫试剂盒    Human tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6 ELISA kit
人肿瘤坏死因子受体相关因子1(TRAF1)免疫试剂盒    Human tumor necrosis factor-associated factor 1,TRAF1 ELISA kit
人肿瘤坏死因子受体超家族成员18(TNFRSF18)免疫试剂盒    Human TNFRSF18 ELISA KIT
人肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)免疫试剂盒    Human TNFsR-ⅠELISA KIT
人肿瘤坏死因子超家族15(TL1A/TNFSF15)免疫试剂盒    Human tumor necrosis factor superfamily 15,TL1A/TNFSF15 ELISA Kit
人肿瘤坏死因子γ(TNFγ)免疫试剂盒    Human Tumor Necrosis Factor γ,TNFγ ELISA Kit
人肿瘤坏死因子β(TNF-β)免疫试剂盒    Human TNF-β ELISA KIT
人肿瘤坏死因子α转化酶(TACE)免疫试剂盒    Human TNF α converting enzyme,TACE ELISA Kit
人肿瘤坏死因子α(TNF-α)抗体免疫试剂盒    Human Tumor necrosis factor α(TNF-α)antibody ELISA kit
人肿瘤坏死因子α(TNF-α)免疫试剂盒    Human TNF-α ELISA KIT
人肿瘤关联钙信号转导因子2(TACSTD2)免疫试剂盒    Human TACSTD2 ELISA Kitelisa检测试剂盒

 

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