双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）
- 发布时间：2015/12/7 9:31:10
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ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。该法适于测定细胞培养上清、血清、血浆及组织液中的样本，干扰小可以测到每毫升纳克水平的细胞因子（或受体）的水平。在这种测定方法中有3种必要的试剂：
①固相的抗原或抗体。
②酶标记的抗原或抗体。
③酶作用的底物。
根据ELISA试剂盒的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。
（一）双抗体夹心法。
（二）双位点一步法。
（三）间接法测抗体。
（四）竞争法。
（五）捕获法测IgM抗体。
（六）应用亲和素和生物素。
ELISA试剂盒普遍用作非放射性同位素的成键化验. 在这种方法中, 通常标准配体是固定的, 通过加入溶液相受体或蛋白质来使之成键. 通过加入与受体特异性反应的抗体来定量成键的受体, 而且zui初抗体的量以加入第二种能显色的抗体测量. 第二种抗体能识别抗体的末端, 在其末端的碱性磷酸酯或过氧化物酶等与酶发生反应, 从而使溶液显色.
操作注意事项
1. ELISA试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶*溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
4. 所有液体组分使用前充分摇匀。