小鼠多效生长因子ELISA 检测试剂盒内容
- 发布时间：2012/9/4 9:40:07
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试验原理：
PTN试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知PTN浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将PTN和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中PTN的浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制
小鼠多效生长因子ELISA检测试剂盒
试剂盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制
96/48人份酶标板1块板（96T）半块板（48T）即用型
塑料膜板盖1块半块即用型
标准品：1600pg/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按说明书进行稀稀
空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型
标准品稀释缓冲液1瓶（4.0ml）1瓶（2.0ml）即用型
生物素标记的抗PTN抗体1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型
亲和链酶素-HRP1瓶（8.0ml）1瓶（4.0ml）即用型
洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按说明书进行稀释
底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型
底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型
终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型
标本稀释液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型
自备材料
蒸馏水。
加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
振荡器及磁力搅拌器等。
安全性小鼠多效生长因子ELISA检测试剂盒
避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项
试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法
血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
试剂的准备
标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：
1600pg/ml（6号标准品）原倍浓度不用稀释直接加入50ul。
800pg/ml（5号标准品）100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液
400pg/ml（4号标准品）100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液
200pg/ml（3号标准品）100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液
100pg/ml（2号标准品）100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液
50pg/ml（1号标准品）100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液
0pg/ml（空白对照）原始浓度不用稀释直接加入50ul。
洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。小鼠多效生长因子ELISA检测试剂盒
抗ENA抗体金标法血清20T/40T
抗核抗体（ANA）金标法血清20T/40T
抗ds-DNA抗体金标法血清24T/48T
抗SS-DNA抗体金标法血清20T/40T
抗SM抗体金标法血清20T/40T
抗组蛋白抗体金标法血清20T/40T
类风湿因子（IgA\IgM\IgG）金标法血清20T/40T
抗“O”试剂金标法血清20T/40T
抗精子抗体（IgA\IgM\IgG）金标法血清24T/48T
抗心磷脂抗体（IgA\IgM\IgG）金标法血清24T/48T
抗子宫内膜抗体（IgG\IgM）金标法血清24T/48T
小鼠多效生长因子ELISA检测试剂盒