博研生物ELISA试剂盒售前、售中、售后免费技术服务，索说明书
产品名称        兔子抗中性粒细胞颗粒抗体（ANGA）ELISA试剂盒* 
英文名称        Rabbit anti-neutrophil granules antibody,ANGA   ELISA KIT
方法                酶联免疫法/酶免法（ELISA）
产品货号        BYS12469B 
规格                96T/48T
标本                血清/血浆/细胞培养上清液/组织匀浆/组织液/尿液/分泌物

样品收集、处理及保存方法：
1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅       速小心地分离.
2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒.
3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物.
4、 保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血       清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻.

兔子抗中性粒细胞颗粒抗体（ANGA）ELISA试剂盒*操作步骤    
方法一　用于检测未知抗原的双抗体夹心法:　　
1.　包被：用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg／ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。　　
2.　加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。　　
3.　加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃孵育0.5～1小时，洗涤。　　
4.　加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。　　
5.　终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。　　
6.　结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+"、“-"号表示。也可测O·D值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔O·D值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。　　
方法二　用于检测未知抗体的间接法：　　　　　
用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃过夜。次日洗涤3次。加一定稀释的待检样品（未知抗体）0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。（同时做空白、阴性及阳性孔对照）于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体（抗抗体）0.1ml，37℃孵育30-60分钟，洗涤,zui后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法"的4、5、6。

兔子抗中性粒细胞颗粒抗体（ANGA）ELISA试剂盒*相关产品：

BYS12724B 犬胰岛素受体β（ISR-β）ELISA试剂盒
BYS12725B 犬内皮素1（ET-1）ELISA试剂盒
BYS12726B 犬血栓前体蛋白（TpP）ELISA试剂盒
BYS12727B 犬血栓素B2（TXB2）ELISA试剂盒
BYS12728B 犬内皮型一氧化氮合成酶（eNOS）ELISA试剂盒
BYS12729B 犬睾酮（T）ELISA试剂盒
BYS12730B 犬促卵泡素（FSH）ELISA试剂盒
BYS12731B 犬雌二醇（E2）ELISA试剂盒
BYS12732B 犬β内啡肽（β-EP）ELISA试剂盒
BYS12733B 犬促黄体生成激素（LH）ELISA试剂盒
BYS12734B 犬血栓调节蛋白（TM）ELISA试剂盒
BYS12735B 犬肝素辅因子Ⅱ（HCⅡ）ELISA试剂盒
BYS12736B 犬转移生长因子β1（TGF-β1）ELISA试剂盒
BYS12737B 小鼠凋亡诱导因子（AIF）ELISA试剂盒
BYS12738B 小鼠热休克因子1（HSF1）ELISA试剂盒
BYS12739B 小鼠血小板因子3（PF-3）ELISA试剂盒
BYS12740B 小鼠白介素2受体（IL-2R）ELISA试剂盒
BYS12741B 小鼠可溶性Endoglin（ENG/sCD105）ELISA试剂盒
BYS12742B 小鼠转化生长因子β2（TGFβ2）ELISA试剂盒
BYS12743B 小鼠单核细胞趋化蛋白4（MCP-4/CCL13）ELISA试剂盒

ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、牽9体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。