1．效价测定：采用间接ELISA 测定OLApAb 效价，基本程序参照Tijssen的方法。

（1） *步，包被。用包被原OLA-OVA 包被96 孔酶标板，包被浓度为0.4μg/mL，包被量为每孔100μL，37℃温育2h，PBST 洗板6 次并拍干（下同）；

（2） 第二步，封闭。用5%猪血清封闭，每孔200μL，37℃温育1h，洗板；

（3） 第三步，加多抗血清。将采出来的多抗血清先用PBS 稀释200 倍，每孔50μL，用封闭液倍比稀释，设阴性对照（NC）和空白对照（BC），37℃温育20min，洗板；

（4） 第四步，加GaMIgG-HRP。将GaMIgG-HRP 用封闭液稀释1000 倍，每孔50μL，37℃温育30min，洗板；

（5） 第五步，显色。加酶底物TMB，每孔50μL，室温反应5min；

（6） 第六步，终止显色反应。每孔加入终止液50μL，用酶标仪读OD450 值；

（7） 第七步， 结果判断。以待测孔OD450 值≥NC OD450 值的2.1 倍（P/N≥2.1），判断为阳性。

2．敏感性测定：采用间接竞争ELISA试剂盒 鉴定其敏感性。间接竞争ELISA 测定抗血清对OLA 的半数抑制浓度（IC50），并以IC50 作为敏感度。其操作步骤与间接ELISA 的区别在于第三步先加入不同浓度的OLA 溶液各50μL 作为抑制剂，再加入OD450 值zui接近1.0 的稀释过的小鼠血清50μL。

3．特异性测定：采用交叉反应试验鉴定其特异性。交叉反应试验选择OLA及卡巴氧、乙酰甲喹、*、噁喹酸等为竞争物，用间接竞争ELISA 测定各竞争物的IC50，以pAb 对OLA 的IC50 与各竞争物的IC50 之比的百分数为其交叉反应率（CR%）。