细胞培养对无血清培养基的适应
时间:2014-04-24 阅读:219
细胞培养对无血清培养基的适应
有两种方法可以使细胞适应无血清培养基(SFM):
1.直接适应法式—将细胞直接从添加血清的培养基转换到无血
清培养基中。
2.连续适应或循序隔绝法—分几步将细胞从添加血清的培养基
转换到无血清培养基中。与直接适应法相比较,连续适应法对于
细胞更温和些。
为了使细胞适应无血清培养基,关键是细胞培养应满足以下条
件:
1.处于对数生长中期
2.存活率大于90%
3.在适应期间,以较高的初始细胞接种量进行接种
下面列出了常规适应步骤。初始细胞接种量、细胞产量和培养
周期是连续优化的良好开端。
直接适应
有些类型的细胞可以直接从含有血清培养基适应无血清培养基。
对于直接适应,细胞接种量应在2.5 x 105 -3.5 x 105细胞/ml范围
内,当细胞密度达到1 x 106-3 x 106细胞/ml时,传代培养细胞。
培养4至7天后,当细胞密度达到2 x 106 -4 x 106细胞/ml时,细
胞已*适应了无血清培养基。当细胞密度达到1x 106 -3 x 106
细胞/ml且存活率为90%时,应当每隔3到5天再次将适应了无血
清培养基的贮存细胞在无血清培养基中进行传代培养。
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