脂肪细胞增强结合蛋白1

脂肪细胞增强结合蛋白1

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2016-01-10 23:43:36
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产品简介

脂肪细胞增强结合蛋白1经过*实践已经发展的相当成熟,在免疫学诊断中的应用也相当广泛。

详细介绍

脂肪细胞增强结合蛋白1动物体内单抗的方法迄今为止,通常情况下均采用动物体内单抗的方法,鉴于绝大多数动物用杂交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤细胞与同品系的脾细胞融合而得,因此使用的动物当然*BALB/c小鼠。本方法即将杂交瘤细胞接种于小鼠腹腔内,在小鼠腹腔内生长杂交瘤,并产生腹水,因而可得到大量的腹水单抗且抗体浓度很高。可见该法操作简便、经济,不过,腹水中常混有小鼠的各种杂蛋白(包括Ig),因此在很多情况下要提纯后才能使用,而且还有污染动物病毒的危险,故而用SPF级小鼠。 脂肪细胞增强结合蛋白1A、材料:a. 成年BALB/c小鼠。b. 降植烷(Pristane)或液体石蜡。c. 处于对数生*的杂交瘤细胞。
B、方法:a. 腹腔接种降植烷或液体石蜡,每只小鼠0.3-0.5ml。b. 7-10天后腹腔接种用PBS或无血清培养基稀释的杂交瘤细胞,每只小鼠5×105/0.2ml。c. 间隔5天后,每天观察小鼠腹水产生情况,如腹部明显膨大,以手触摸时,皮肤有紧张感,即可用16号针头采集腹水,一般可连续采2-3次,通常每只小鼠可采5-10ml腹水;d. 将腹水离心(2000r/min 5分钟),除去细胞成分和其他的沉淀物,收集上清,测定抗体效价,分装,-70℃冻存备用,或冻干保存。
(2) 体外培养单抗的方法总体上讲,杂交瘤细胞系并不是严格的贴壁依赖细胞(anchorage dependent cell,ADC),因此既可以进行单层细胞培养,又可以进行悬浮培养。
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 Human 17-ketosteroids,17-KS 人17-酮类固醇(17-KS)
Human 17-Hydroxycorticosteroids,17-OHCS 人17羟皮质类固醇(17-OHCS)
Human Cathepsin K,cath-K 人组织蛋白酶K(cath-K)
Human bone morphogenetic proteins,BMPs 人骨形成蛋白(BMPs)
Human Retinol binding protein 4,RBP-4 人*结合蛋白4(RBP-4)
Human proteolipid protein,PLP 人蛋白脂质蛋白抗体(PLP)
Human vanillylmandelic acid,VMA 人垂草扁桃酸(VMA)
Human glucokinase regulatory protein,GKRP 人葡萄糖激酶调节蛋白(GKRP)
Human hemagglutinin,HA 人血凝素(HA)
Human adipose differentiation-related protein,ADRP 人脂肪分化相关蛋白(ADRP)
Human Caldesmon,CALD 人钙调结合蛋白(CALD)
Human calcineurin,CaN 人钙调磷酸酶(CaN)
Human CTX-2 人骨退化特异标志物(CTX-2)
Human Calretinin,CR 人钙结合蛋白(CR)
    杂交瘤细胞的单层细胞培养法是各个实验室zui常用的手段,即将杂交瘤细胞加入培养瓶中,以含10-15%小牛血清的培养基培养,细胞浓度以1×106-2×106/ml为佳,然后收集培养上清,其中单抗含量约10-50ug/ml。显然,这种方法制备的单抗量极为有限,无疑是不适用于单抗的大规模。要想在体外大量制备单抗,就必须进行杂交瘤细胞的大量(高密度)培养。单位体积内细胞数量越多,细胞存活时间越长,单抗的浓度就越高,产量就越大。 

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