ELISA试剂盒具体的方法步骤可有多种

    ELISA试剂盒稳定、易保存，操作简便，结果判断较客观等因素。ELISA试剂盒原理——ELISA试剂盒是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。

    由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中，通过不同的设计。

    即:用于检测抗体的间接法（图a）、用于检测抗原的双抗体夹心法（图b）以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。
ELISA试剂盒检测前准备工作
1. 请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒，平衡至室温。
2. 将浓缩洗涤液用双蒸水稀释（1:25）。未用完的放回4℃。从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶，属于正常现象，可用40℃水浴微加热使结晶*溶解后再配制洗涤液。（加热温度不要超过50℃）使用时洗涤液应为室温。
3. 标准品: 加入标准品&标本稀释液1.0ml至冻干标准品中，静置10分钟，待其充分溶解后，轻轻混匀（浓度为5000 pg/ml）。然后根据需要进行倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释）。建议配制成以下浓度： 2500、1250、625、312.5、156.2、78.1、39.05、0 pg/ml。样品稀释液直接作为空白孔 0 pg/ml。如配制2500pg/ml标准品：取0.5ml （不要少于0.5ml ）5000pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的EP管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
4. ELISA试剂盒*化抗体工作液：实验前计算当次实验所需用量（以100μl/孔计），实际配制时应多配制100-200μl。使用前15分钟，以*化抗体稀释液稀释浓缩*化抗体（1:100）成工作浓度。当日使用。
5. 酶结合物工作液：ELISA试剂盒实验前计算当次实验所需用量（以100μl/孔计），实际配制时应多配制 100-200μl。使用前15分钟，以*化抗体稀释液稀释浓缩*化抗体（1:100）成工作浓度。当日使用。