人脑钠肽ELISA检测试剂盒

试验原理：

ANP试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知ANP浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将ANP和*标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中ANP的浓度呈比例关系。

试剂盒内容及其配制：

试剂盒成份

96孔配置

48孔配置

96/48人份酶标板

1块板（96T）

半块（48T）

塑料膜板盖

1块

半块

标准品：400pg/ml

1瓶（1.0ml）

1瓶（0.5ml）

空白对照

1瓶（1.0ml）

1瓶（0.5ml）

标准品稀释缓冲液

1瓶（8.0ml）

1瓶（4.0ml）

*标记的抗ANP抗体

1瓶（8.0ml）

1瓶（4.0ml）

亲和链酶素-HRP

1瓶（12ml）

1瓶（6.0ml）

洗涤缓冲液

1瓶（20ml）

1瓶（10ml）

底物A

1瓶（6.0ml）

1瓶（3.0ml）

底物B

1瓶（6.0ml）

1瓶（3.0ml）

终止液

1瓶（6.0ml）

1瓶（3.0ml）

自备材料：

蒸馏水。

加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振荡器及磁力搅拌器等。

样品收集、处理及保存方法：

血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

细胞上清液---1000×g离心10分钟除颗粒和聚合物。
组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

操作注意事项：

试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。