微生物的糖类发酵试验阐明
时间:2020-06-30 阅读:251
糖发酵试验是常用的辨别微生物的生化反响,在肠道细菌的判定上尤为重要。绝大多数细菌都能运用糖类作为碳源和动力,但是它们在分化糖类物质的才干上有很大的差异。有些细菌能分化某种糖发生有机酸(如乳酸、醋酸、丙酸等)和气体(如氢气、甲烷、二氧化碳等);有些细菌只产酸不产气。
不同的细菌可根据分化运用糖才干的差异表现出是否产酸产气作为判定菌种的根据。例如大肠杆菌能分化乳糖和葡萄糖产酸并产气;伤寒杆菌分化葡萄糖产酸不产气,不能分化乳糖;一般变形杆菌分化葡萄糖产酸产气,不能分化乳糖。发酵培育基含有蛋白胨,指示剂(溴甲酚紫),倒置的德汉氏小管和不同的糖类。当发酵产酸时,溴甲酚紫指示剂可由紫色(pH6.8)变为黄色(pH5.2)。气体的发生可由倒置的德汉氏小管中有无气泡来证明。
糖发酵试验一般选用试管、德汉氏小管、试管架及各种糖类试剂等多种试剂和耗材,操作繁琐,耗时较长。怎么能够简洁试验流程,节省时间呢?近年来,HiMedia公司的出产的糖发酵试剂盒在国ji上悄然盛行。
该试剂盒含35项糖发酵检查,其间A盒和B盒各含12项糖发酵试验,C盒含11项糖发酵试验和1个对照试验,经过微生物发酵反响,培育基颜色发生改变。
A盒:乳糖、木糖、麦芽糖、果糖、葡萄糖、半乳糖、棉子糖、海藻糖、蜜二糖、蔗糖、L-阿拉伯糖、甘露糖
B盒:菊粉、葡糖酸钠、甘油、水杨苷、己六醇、肌醇、*、*、核糖醇、阿糖醇、赤藻糖醇、-甲基-D-葡萄糖苷
C盒:鼠李糖、纤维二糖、松三糖、α-甲基-D-甘露糖苷、*、邻硝基酚-β半乳糖苷(ONPG)、七叶苷、D-阿拉伯糖、柠檬酸盐、丙二酸、山梨糖、对照
待判定菌种应先jin行分离和纯化。可在HiMedia营养琼脂或脑心浸膏琼脂上挑取一个菌落,接种在5ml脑心浸膏肉汤中,在35-37℃培育4-6小时,直到在620nm处,接种液浊度≥0.5OD。一些苛养菌或许需求孵育跨越6小时,以保证接种液浊度抵达0.5OD。
无菌翻开试剂盒,撕掉封条。每孔接种50μl上述菌液。也可用接种环划线。在35±2℃孵育18-24小时即可,显色作用与《作用诠释表》、《菌种标准表》比对后,从而对菌种作出判定,几乎包含一切的糖类发酵试验,一次性即可出试验作用,便当快