在ELISA实验中，显色与比色是万万不可忽略的一个方面。在本月初时，上海恒远技术专员特别为2014年试剂盒的使用做出了总结与分析。今天我们主要针对ELISA显示与比色，一起来看本年度ELISA试剂盒年末资料总结大放送。
    ELISA通过显色反应，在酶标仪上测定吸光度，与标准曲线比较得出可溶性蛋白总量。ELISPOT也是通过显色反应，在细胞分泌这种可溶性蛋白的相应位置上显现清晰可辨的斑点，可直接在显微镜下人工计数斑点或通过计算机辅助的分析系统对斑点进行计数，1个斑点代表1个细胞，从而计算出分泌该蛋白的细胞的频率。由于是单细胞水平检测，ELISPOT比ELISA更灵敏，能从20万-30万细胞中检出1个分泌该蛋白的细胞。捕获抗体具有高亲和力、高特异性、低内毒素的单抗，在研究者以刺激剂激活细胞时，不会影响活化细胞分泌细胞因子。   

    比色前应先用洁净的吸水纸拭干板底附着的液体，然后将板正确放入酶标比色仪的比色架中。以软板为载体的试验，需先将板置于标准96孔的座架中，才可进行比色。在加底物液显色前，先将软板边缘剪净，这样，此板就可*平妥坐入座架中。比色时应先以蒸馏水校零点，测读底物孔和空白孔，以记录本次试验的试剂状况。其后可用空白孔以蒸馏水校零点，以上各孔的吸光度需减去空白孔的吸光度，然后进行计算。
    比色结果的表达以往通用光密度，现按规定用吸光度，两者含义相同。通常的表示方法是，将吸收波长写于A字母的右下角。

相关问题分析：
1. 酶结合物的稀释液
    在稀释液中常加入高浓度的无关蛋白质，通过竞争抑制酶结合物在固相载体上的非特异性吸附。一般还加入能够抑制蛋白质吸附于塑料表面的非离子型表面活性剂。
2. 正确稀释酶结合物 
    酶结合物的合适工作浓度需要通过预实验来确定，浓度过高易导致本底偏高，浓度过低则会导致阳性信号的减弱。酶结合物在使用前稀释，稀释后的酶结合物不宜长期保存，因为低浓度的酶结合物极易失活。