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恒远生物为您揭秘——鲎实验法

时间:2022-10-19      阅读:1959

鲎试剂简介:

鲎的身上流淌着一种十分珍奇的血液。这种血液是淡蓝色的。这种淡蓝色的血液中含铜量很高,而且一遇到细菌就会凝固。利用鲎血液的这种特殊反应,对它进行处理,可以制成一种特殊的检验试剂——“鲎试剂”。鲎试剂可以准确、快速地检测人体内部组织是否因细菌感染而致病;在制药和食品工业中,也可用它对毒素污染进行监测。


实验原理:鲎是一种海洋节肢动物,血液中含有一种变形细胞,此细胞的裂解物可与微量细菌内毒素起凝胶反应,即细胞裂解物中的一种酶被内毒素激活,使细胞裂解物中蛋白质形成凝胶。鲎试验具有快速、简便、灵敏等优点。


材料与仪器:鲎试剂、生理盐水、无菌水、内毒素、安瓶等。


操作步骤:

一、材料

1.  鲎试剂(即装于安瓶内的鲎变形细胞裂解物的冻干制品)。

2.  待测物(血液、细菌培养上清液或注射剂等)。

3.标准内毒素(大肠杆菌内毒素含量100 ng/ml)、无热原生理盐水、无菌蒸馏水

4.1 ml无菌吸管、37℃水浴箱等。

 

二、方法

1.  打开3支鲎试剂安瓶,各加0.1 ml无菌蒸馏水使之溶解,同时编号①、②、③。

2.  向①、②、③安瓶中分别加待测物、标准内毒素、无热原生理盐水各0.1 ml。

3.  轻轻摇匀后,垂直放37℃水浴,15~30 min后取出观察有无凝固。


三、结果观察

十十 形成牢固凝胶,倒持安瓶凝胶不动。

十 形成凝胶,但不牢固,倒持安瓶凝胶能动。

- 不形成凝胶。

凡结果阳性者表示内毒素阳性,本实验②为阳性对照,③为阴性对照。


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