昨天我司的吴在页面留言中看到了一个新手朋友的求助。

     客户：我用ELISA双抗夹心的方法检测NGF，做出的标准曲线数值很低，搞不懂是什么原因造成的，我是新手不知是否有些细节自己没有注意到

     吴：如果试剂盒很贵，自己又没有操作过建议找专也人员帮你做！

     客 户：试剂盒是很贵，不过我还是希望自己能做出来。

     吴：你用的是人血清还是组织匀浆？注意滴加计量的把握！查过文献吗？它在你的组织中表达是否较高？

     客户：我要检测的是细胞培养基中细胞分泌的蛋白量，表达量不高，作出来的几个曲线很不标准，线性关系不明显，我不知道是为什么。

     吴：ELISA 是一种敏感性高、特异性强、重复性好的实验诊断方法，由于其试剂稳定、易保存、操作简便、结果判断较客观等因素，以及既适宜于大规模筛查试验又可以用于少量标本的检测，既可以做定性试验也可以做定量分析等优点，已广泛应用于微生物学、寄生虫学、肿瘤学和细胞因子等领域。ELISA 的影响因素较多，加强质量管理才能充分发挥其方法学的优点。一般加标本一般用微量加样器，按规定的量加入板孔中。每次加标本应更换吸嘴，以免发生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加样。有此测定（如间接法 ELISA ）需用稀释的血清，可在试管中按规定的稀释度稀释后再加样。也可在板孔中加入稀释液，再在其中加入血清标本，然后在微型震荡器上震荡1 分钟以保证混和。加酶结合物应用液和底物应用液时可用定量多道加液器，使加液过程迅速完成。垂直加入,避免漏吸或少吸,洗涤时避免串孔等等诸多值得注意的地方.所以一定要多加练习!

     相信经过吴的全面解析这位朋友下次的实验一定会成功的。

     我公司是一家科学检验、研发和销售为一体的生物技术型公司，公司成立以来跟诸多高等院校、科研院所有所合作。选购elisa试剂盒首先上海恒远生物公司