ELISA实验结果出现负值的原因分析
时间:2015-09-29 阅读:8011
客户经常会问用两个不同厂家的ELISA盒子测人血清中的TNF-α等指标时都出现浓度负值, ,考虑是不是洗版太厉害了还是反应温度不够,做第二遍的时候将实验方法,做了少许调整,将板置入36-37摄氏度的烘箱中反应,结果吸光度更低了,测的样本的浓度仍然有很多负值,目前有两个问题:1、目前的负值数据该怎么处理?2、为什么会出现这样的问题?
恒远技术答复:血清中TNF-α值为负数,可能有如下原因引起的:
*、因为保存问题,TNF-α在血清中极易降解造成测量值很小。
第二、因为血清中一些物质对测量有干扰,造成OD值较低,甚至低于0浓度的OD值,表现为负值。
第三、实验温度造成的,建议严格按照据说明书要求操作。
样本正确保存方法:ELISA实验血清、血浆样本正确采集方法:检测的样本,及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本,及时分装后冻存在-20℃备用,有条件的,-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。