哪些原因造成实验反应试剂盒灵敏度低
时间:2015-06-10 阅读:1178
对应实验新手经常反应:实验结束后,包括阳性对照、质控在内的所有板孔颜色均较淡。要求厂家技术答复这是什么原因造成的?
我司技术答可能原因:
1.试剂盒超过期, 超过有效期的产品可能会产生很弱的信号; 试剂盒没有按规定进行保存,受高温影响。
2.试剂、样品用前未平衡至室温
3.加入试剂的体积和时间有误, 移液器计量不准,吸嘴内水分太多或不清洁;
4.洗板及加样过程中,酶标受污染失活而失去催化显色剂显色的能力
5.孵育时间及孵育温度未达到要求 ,反应板放入培养箱时注意温度并及时调整。
6.洗板次数过多,或浓缩洗液稀释倍数不符合要求;洗涤冲击力太大。浸泡时间太长;
7.显色剂加量不足或顺序颠倒,或混合后加入;
8.底物作用时间不够;
9.蒸馏水水质有问题;
实验前应做好的准备:
1.实验前检查试剂的组分及批号,确认试剂未过期。 不要将试剂盒长时间置于常温下,按使用规定储藏。
2.确定所使用的试剂体积正确,加入时间适当。 校正移液器,移液器与吸嘴配合要紧密吻合。移液不宜太快,排放应*。
3.确认盛酶标的容器不含酶抑制剂如叠氮钠等,确认配制洗液的容器已洗干净,确认配制洗液的纯化水达到要求且未受污染。
4.孵育温度应控制在 37-38℃,孵育时间严格按照说明书操作。 保温期内不宜多开门,以免影响保温。
5.严格按说明书要求稀释浓缩洗液及洗板,减小洗涤冲击力,按说明书要求置留洗涤液时间和洗涤次数。
6.显色剂滴瓶垂直向下,持力均匀,滴速不宜过快,先加显色剂 A,后加显色剂B,不可将A、B液混合后加入
7.准确定时。
8.测定蒸馏水配制试剂对酶免疫法的影响。