实验细节:酶标板稳定性的判断
时间:2015-04-20 阅读:1511
酶标板作为ELISA检测实验中的辅材,起着举足轻重的作用并直接影响zui终实验结果,酶标板的好坏主要取决于其对蛋白吸附的灵敏度、板孔间蛋白吸附能力差异以及所采购酶标板批次间的差异。因此,选择一款蛋白吸附灵敏度高、对蛋白吸附能力孔间差异小、批次间差异小的酶标板产品,是实验者获得可靠、稳定实验结果的保障。
根据孔数,可分为96孔、48孔等,由于酶标板主要是配合酶标仪用,目前市面上的酶标仪zui多为96孔,因此酶标板zui为常用的也是96孔。
酶标板性能判断:
良好的酶标板应该是吸附性能好,空白值低,孔底透明度高,各板之间、同一板各孔之间性能相近。酶标板由于原料的不同和制作工艺的差别,各种产品的质量差异很大,因此,每一批号的酶标板在使用前须事先检查其性能。
常用的检查方法为:以一定浓度的人IgG(一般为10ng/ml)包被ELISA板各孔,洗涤后每孔内加入适当稀释度的酶标抗人IgG抗体,保温后洗涤,加底物显色,终止酶反应后,分别测每孔溶液的吸光度。控制反应条件,使各孔读数在吸光度0.8左右。计算全部读数的平均值。所有单个读数与全部读数的均数之差,应小于10%。