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ELISA检测试剂盒操作技巧与样本处理

时间:2020-11-25      阅读:301

ELISA检测试剂盒样本处理:

1. 细胞培养上清:适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以1000×g离心15分钟,收集上清。

2. 细胞:用PBS反复洗涤细胞3次,调整细胞浓度达到104-106/ml 左右,通过反复冻融,使细胞破坏并放出细胞内成份,或者细胞超声粉碎,离心取上清液检测。

3. 血清:在室温下,血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。

4. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置10-20 分钟后,以1000×g离心15分钟,收集上清。

5. 体液:包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集,以1000×g离心15分钟,收集上清。

6. 组织标本:切取组织标本,称取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或匀浆器,或超声破碎仪将标本匀浆,以2000-3000rmp离心20 分钟,收集上清进行检测。

7. 样品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

8. 保存:如果样品ELISA检测试剂盒不能立即检测,应将其分装,-70 ℃保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀,应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA试剂盒 

Human Macrophage Inflammatory Protein-1α, MIP-1α Elisa Kit 96T/48T 人巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA试剂盒

Human Macrophage-Derived Chemokine, MDC Elisa Kit 96T/48T 人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)ELISA试剂盒

Human Macrophage-Derived Chemokine, MDC Elisa Kit 96T/48T 人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)ELISA试剂盒

Human Macrophage Colony-Stimulating Factor, M-CSF Elisa Kit 96T/48T 人巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA试剂盒

Human monocyte chemotactic protein 3, MCP-3 Elisa Kit 96T/48T 人单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA试剂盒

Human monocyte chemotactic protein 2, MCP-2 Elisa Kit 96T/48T 人单核细胞趋化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA试剂盒

ELISA检测试剂盒操作技巧:

1.操作前应对试验的物理参数有充分的了解,如环境温度(保持在18 C~25℃)、反应孵育温度和孵育时间、洗刷的次数等,要先查看水育箱温度,ELISA试剂盒是否符合要求。

2.正确使用加样器加样器应笔直参加标本或试剂,避免刮擦包被板底部。加样过程中避免液体外溅,血清残留在反应孔壁上,加样器吸头要清洗干净,避免污染,加样次第要与说明书一起,否则可导致效果过错,试验重复性差。

3.手工洗板加洗液时冲击力不要太大,洗刷次数不要逾越说明书举荐的洗刷次数,洗液在反应孑L内停留的时间不宜太长。不要使洗液在孑L间窜流,形成孔问污染,导致假阴性或假阳性。

4.要保证加液量一起 我们在使用时感觉滴瓶加液不如加样器好,滴瓶不易控制加液量禁绝,形成显色不一致,判别过错。

 5.显色液量不可过多 加样的工作环境不能处于阳光直射的环境下,加显色系统后要避光反应,显色液量不能过多,避免显色过强。 

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