大鼠Elisa试剂盒原理：

    采用竞争法测定金黄地大鼠Elisa试剂盒低密度脂蛋白OXLDL水平。用金黄地鼠氧化低密度脂蛋白OXLDL抗原包被微孔板，制成固相载体，实验时依次在微孔板中加入标本及标准品，并加入HRP标记的OXLDL抗体，标本及标准品中的抗体和一定量的酶标抗体竞争与固相抗原结合。反复洗涤后加底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色，再用硫酸终止反应，转变成黄色。标本中抗体量越多，结合在固相上的酶标抗体愈少，颜色越浅。颜色的深浅和样品中的OXLDL含量呈负相关。采用酶标仪在450nm波长测定吸光度（OD值），根据标准曲线，计算测试样品中OXLDL浓度。

大鼠Elisa试剂盒注意事项：

1.试剂准备：所有大鼠Elisa试剂盒都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存。实验操作中必须使用一次性吸头，避免交叉污染。

2．加样：加样时，要控制加样速度，避免*孔与zui后一孔之见的时间间隔过大，否则将会导致不同的预孵育时间，从而影响实验的准确性以及重复性；一般加样时间控制在10分钟内，如果样本数量过多，可使用多道移液器。

3.孵育：样品要在密闭的容器内进行孵育，严格按照说明书上规定的孵育时间和温度进行。

4.洗涤：洗涤过程中反应孔中的残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，同时要消除板底残留的液体和手指痕迹，避免影响zui后的酶标仪读数。

5.反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，10分钟左右)，如果颜色较深，请提前加入终止液终止反应。

6.建议实验前预测样品含量，如样品浓度过高，应对样品进行稀释，计算结果时乘以相应的稀释倍数。

7.建议使用本试剂盒时先做预实验(即先做标准曲线，试用几个标本)，如果对本试剂盒有任何疑问，可和所购经销商，如果因运输过程导致试剂盒失效，可要求调换，但概不承担产品本身以外的任何损失。

大鼠Elisa试剂盒操作程序：

1. 弃去液体，甩干，每孔加满稀释后洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。如此重复5次，拍干。

2. 每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。。

3. 取出酶标板，每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

4.测定：以空白孔调零，在450nm波长下测量各孔的吸光度值（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

5.根据大鼠Elisa试剂盒标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种应用软件来计算。应记住由于样品稀释了的，其实际浓度应该乘以总稀释倍数。