磺胺甲恶唑（SMZ）ELISA试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

1 使用目的：

本磺胺甲恶唑（SMZ）试剂盒用于饲料、鱼、虾和肉类组织（如鸡、牛肉和猪肉），血清和尿样中磺胺甲恶唑（SMZ）残留的定量检测。

2 实验原理

本磺胺甲恶唑（SMZ）试剂盒采用竞争ELISA 方法，在微孔板包被有磺胺甲恶唑（SMZ）偶联抗原，加入磺胺甲恶唑（SMZ）标准品或样品，游离磺胺甲恶唑（SMZ）与微孔条上预包被的磺胺甲恶唑（SMZ）偶联抗原互相竞争抗磺胺甲恶唑（SMZ）抗体酶标记物，用TMB 底物显色，加入终止液后颜色由蓝色变为黄色，用酶标仪在450nm 波长下进行检测，吸光值与样品中磺胺甲恶唑（SMZ）含量成反比，通过标准曲线计算样品中磺胺甲恶唑（SMZ）的含量。

3 试剂盒组成

3.1 预包被的磺胺甲恶唑（SMZ）偶联抗原的可拆酶标板：1 块（12 孔×8 条）。

3.2 磺胺甲恶唑（SMZ）标准品：6 瓶（1ml/瓶），含量分别是： 0 ppb，0.1 ppb,0.3 ppb,0.9ppb,2.7ppb,8.1 ppb。

3.3 磺胺甲恶唑（SMZ）抗磺胺甲恶唑（SMZ）抗体酶结合物：1 瓶（6ml）。

3.4 显色液A：1 瓶（6ml）。

3.5 显色液B：1 瓶（6ml）。

3.6 终止液：1 瓶（6ml），2M 硫酸。

3.7 样本稀释液：1 瓶（10×, 6ml），用于样品稀释用。

3.8 浓缩洗涤液：1 瓶（20×，20ml），用于洗板。

3.9 说明书一份。

4 需要而未提供的材料

4.1 磺胺甲恶唑（SMZ）设备

4.1.1波长450nm酶标仪。

4.1.2粉碎机。

4.1.3量筒。

4.1.4振荡器。

4.1.5漏斗。

4.1.6Whatman 或相当的滤纸。

4.1.7微量移液器。

4.2 试剂

4.2.1去离子水或蒸馏水。

4.2.2 甲醇。

5 贮存

5.1 磺胺甲恶唑（SMZ）试剂盒贮存于2~8℃，切勿冷冻

5.2 未用完的微孔板应该密封干燥保存

6 注意事项

6.1 使用试剂盒前请仔细阅读说明书。

6.2 不要使用过期试剂盒。

6.3 试剂盒使用前，将试剂恢复至室温（25±2℃），建议至少回温2小时。

6.4 标准品中含有磺胺甲恶唑（SMZ），使用时应特别注意，操作时应带手套。

6.5 终止液中含有硫酸，使用时防止灼伤皮肤及腐蚀衣物。

6.6 不同标准品、样品所用吸头不能混用，否则会影响试验结果。

6.7 不同批号试剂盒中的磺胺甲恶唑（SMZ）试剂不得混用；不同标准品、样品所用吸头不得混用，否则会影响实验结果。

6.8 稀释样本时必须用本试剂盒中的样本稀释液，否则会影响实验结果

6.9 混合试剂时应避免起泡。

7 工作液准备

7.1 磺胺甲恶唑（SMZ）标准品溶液：0ppb,0.1ppb,0.3 ppb,0.9ppb,2.7 ppb,8.1ppb

7.2 浓缩洗涤液：用蒸馏水按1:20（1+19）稀释备用

7.3 样本稀释液：用蒸馏水按1:10（1+9）稀释备用

7.3 显色剂：磺胺甲恶唑（SMZ）已备用，避免光线直照

7.4 反应终止液：已备用

8 样品处理程序（样品在提取过程中，要严格按说明书操作，提取过程中应准确稀释，否则会出现结果不准确，样品应当保存在阴凉避光之处及冷藏保存）

8.1取10g粉碎的样品，加 20ml 70%甲醇溶液

8.2强力振荡3分钟

8.3用Whatman 滤纸过滤

8.4取25μl处理后的样品，加入25μl样本稀释液于反应孔中（样本稀释倍数为2）