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培养基现货原代神经细胞悬液的制备方法

时间:2014-07-23      阅读:869

培养基现货原代神经细胞悬液的制备方法

    1、培养基取出生后1-3天内的大鼠脑组织后,先仔细剥除脑膜和血管等纤维成分,置入Hanks液中漂洗1~2次后,置于30~50倍的Hanks液中,脑组织比较柔软,反复吹打即可制成细胞悬液。

  2、为排除脂肪成分和其它碎块,把悬液注入离心管中,在室温直立5~10分钟后,细胞或细胞团块自然下沉,脂肪等杂物易漂浮于悬液表层,吸除上清,如此反复二三次可获得较多的细胞成分。       Anti-HVEM/TNFRSF14/FITC  荧光素标记肿瘤坏死因子受体超家族成员14抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti-Syndecan-1/CD138/FITC  荧光素标记多配体聚糖抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti-CD141/FITC  荧光素标记凝血调节蛋白抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti-VE-cadherin/CD144/VECD/FITC  荧光素标记上皮型钙粘附分子/血管内皮钙粘蛋白抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti-CD146(MCAN)/FITC  荧光素标记抗黑色素瘤细胞粘付分子CD146抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti-CD158a/KIR2DL1/FITC  荧光素标记NK细胞抑制性受体2DL1抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti-CD158b2/KIR2DL3/NKAT2a/FITC  荧光素标记NK细胞抑制性受体2DL3抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti-CD158D/KIR2DL4/G9P/FITC  荧光素标记NK细胞抑制性受体2DL4抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti-CD158e/KIR3DL1/FITC  荧光素标记NK细胞抑制性受体3DL1抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml
Anti-CD158e/KIR3DL1/FITC  荧光素标记NK细胞抑制性受体3DL1抗体IgG    Multi-class antibodies    规格:     0.2ml

  3、向末次沉淀物中加入适量培养基营养液,通过纱网或纱布滤过,计数细胞并调整好细胞密度,接种入培养瓶或皿中,置5%CO2温箱中培养。

  4、细胞生长汇合后,可用0.25%胰蛋白酶消化法做传代处理,加消化液的量以能覆盖细胞层即可,待细胞开始从瓶壁脱离(平均5~10分钟),加入含有血清培养基液,吹打制成细胞悬液。

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