PrimaCell™大鼠脑微血管内皮细胞试剂盒操作要点:

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

胰腺星状细胞

胎盘羊膜细胞

胎盘滋养层细胞

胎盘绒毛膜细胞

脐带单核细胞

胎儿表皮角化细胞

胎儿真皮成纤维细胞

脐静脉内皮细胞

脐动脉内皮细胞

脐静脉平滑肌细胞

脐动脉平滑肌细胞

子宫内膜上皮细胞

子宫平滑肌细胞

子宫成纤维细胞

卵巢上皮细胞

卵巢成纤维细胞

卵巢微血管内皮细胞

乳腺上皮细胞

乳腺成纤维细胞

胰岛β细胞

甲状腺滤泡上皮细胞