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核糖体蛋白S6激酶1抗体实验步骤(建议方案)

时间:2022-04-12      阅读:463

核糖体蛋白S6激酶1抗体实验步骤(建议方案):


1、石蜡切片,常规脱蜡至水


2、蒸馏水冲洗,pbs 浸泡5 分钟(如需采用抗原修复,在此步骤后进行)。


3、3%双氧水去离子水(无色液体)孵育15-20 分钟,以消除内源性过氧物酶活性。


4、滴加试剂A(蓝色液体)室温孵育15-20 分钟,倾去,勿洗。


5、滴加适当比例稀释的一抗,37℃孵育2-3 小时或4℃过夜。


6、PBS 冲洗,3 分钟3 次。


7、滴加试剂B(黄色液体),室温或37℃孵育15-20 分钟。


8、PBS 冲洗,3 分钟3 次。


9、滴加试剂C(橙色液体),室温或37℃孵育15-20 分钟。


10、PBS 冲洗,3 分钟3 次。


11、显色剂显色(DAB 或AEC)


12、自来水充分冲洗。


13、如果需要,可进行复染,脱水,透明。


14、选择适当的封片剂封片。


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