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人CREB调节转录辅激活因子2洗涤方法

时间:2021-10-28      阅读:504

人CREB调节转录辅激活因子2洗涤方法:

1. 自动洗板机:每孔加入洗涤液350μl,注入与吸出间隔60秒。洗板5次。

2. 手工洗板:甩尽孔内液体,在洁净的吸水纸上拍干,每孔加洗涤液350μl,浸泡1-2分钟,吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体,在厚的吸水纸上拍干。洗板5次。

实验开始前,各试剂均应平衡至室温;试剂或样品配制时,均需充分混匀,并尽量避免起泡。

1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样时将样品加于酶标板底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。给酶标板覆膜,37℃孵育2小时。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2.弃去液体,甩干,每个孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分钟内配制),酶标板加上覆膜,37℃温育1小时。

3.弃去孔内液体,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分钟,大约350μl /每孔,甩干并在吸水纸上轻拍将孔内液体拍干。

4.每孔加HRP Conjugate工作液(临用前15分钟内配制)100μl,加上覆膜,37℃温育1小时。

5.弃去孔内液体,甩干,洗板5次,方法同步骤3。

6.每孔加底物溶液100μl,酶标板加上覆膜37℃避光孵育15分钟左右(根据实际显色情况酌情缩短或延长,但不可超过30分钟。当标准孔出现明显梯度时,即可终止)。

7.每孔加终止液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。

8.立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度(OD值)。应提前打开酶标仪电源,预热仪器,设置好检测程序。

9.实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回冰箱保存至有效期结束。

细胞骨架肌动蛋白样蛋白3抗体

膜粘连蛋白8抗体

水通道蛋白8抗体

锚蛋白重复结构域蛋白40抗体

凋亡抑制因子5抗体

水通道蛋白-3抗体

载脂蛋白D抗体

丁酰基辅酶A合成酶3抗体

脂肪细胞源性亮氨酸氨基肽酶抗体

线粒体凋亡诱导因子2抗体

ABL2蛋白抗体

血管紧张素转换酶ACE1抗体

血管紧张素转换酶2抗体

Acinus抗体

醋酸激酶1抗体

促肾上腺皮质激素抗体

促肾上腺皮质激素ACTH抗体

促肾上腺皮质激素ACTH 抗体

活性依赖的神经保护肽抗体

α1酸性糖蛋白1/类粘蛋白1抗体

α1酸性糖蛋白2抗体

磷酸化水通道蛋白2抗体

细胞酪氨酸转氨酶抗体

抗利尿激素/血管升压素/加压素/血管加压素抗体

ATP结合盒蛋白家族GCN20F家族1抗体

醛糖还原酶抗体


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