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人关节软骨细胞培养细胞培养方法

时间:2021-06-17      阅读:626

人关节软骨细胞培养方法:
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

MCF7/Adr人乳腺癌阿霉素耐药株
BEL/Adr人肝癌阿霉素耐药株
SGC7901/Adr人胃癌阿霉素耐药株
BIU-87/Adr人膀胱癌阿霉素耐药株
A549/Adr人肺癌阿霉素耐药株
HL-60/Taxol人白血病紫杉醇耐药株
K562/Taxol人白血病紫杉醇耐药株
A2780/Taxol 人卵巢癌紫杉醇耐药株
HO-8910/Taxol人卵巢癌紫杉醇耐药株
HCT8/Taxol人结肠癌紫杉醇耐药株
A549/Taxol 人肺癌紫杉醇耐药株
hct116/L人结肠癌耐奥沙利铂细胞株
lovo/L人结肠癌耐奥沙利铂细胞株
HCT8/L人结肠癌耐奥沙利铂细胞株
BEL/L人肝癌耐奥沙利铂细胞株
SMMC7721/L人肝癌奥沙利铂耐药株
A549/L人肺癌耐奥沙利铂细胞株
HCT8/FU人结肠癌氟尿嘧啶耐药株
ovo/FU人结肠癌氟尿嘧啶耐药株
SMMC7721/FU人肝癌氟尿嘧啶耐药株
PATU-8988/FU人胰腺癌氟尿嘧啶耐药株
SGC7901/FU人胃癌氟尿嘧啶耐药株
A549/FU人肺癌氟尿嘧啶耐药株
K562/DDP人白血病顺铂耐药株
MCF7/DDP人乳腺癌顺铂耐药株

 

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