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小鼠抗中性粒中心体抗体ELISA试剂盒样本实验前准备步骤

时间:2020-03-12      阅读:400

小鼠抗中性粒中心体抗体ELISA试剂盒样本实验前准备:
ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
1血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右2000-3000转/分。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
2血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右2000-3000转/分。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
3尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右2000-3000转/分。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右2000-3000转/分。仔细收集上清。
5培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBSPH7.2-7.4稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右2000-3000转/分。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBSPH7.4,或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右2000-3000转/分。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
 

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