小鼠ELISA试剂盒实验中的封闭液等常用试剂的配制
时间:2017-08-24 阅读:515
小鼠ELISA试剂盒实验中的封闭液小知识
ELISA的试剂盒说明上写封闭液用蔗糖溶液,一般是用BSA或酪蛋白的蛋白分子封闭空白位点,蔗糖封闭的原理:
1、ELISA实验中,蔗糖本身没有封闭作用;
2、封闭液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。
3、加蔗糖的主要目的是保护ELISA板子吸附(包被)的蛋白,起到“保护剂”的作用。
4、蔗糖溶液一般在ELISA板子经过BSA封闭后加,当然也有将蔗糖加到封闭液中同时进行处理;那一种更好需要你实验后来验证。但多数选择前者。
封闭剂还可用5%的脱脂乳(市售即可),0.4%的明胶,但是实验表明前者比较好,后者不容易洗干净未结合上的明胶。
封闭剂的原理就是与酶联板上未结合抗原或抗体的微孔中用封闭剂封闭上,结合抗体或抗原的时候就不会产生非特异结合了,不会影响实验的准确度。
tween的作用:虽然不能单独封闭,但和BSA在封闭时会起到清洗非特异性结合或结合不牢固的蛋白的作用,假如抗体包被在板上会出现YY-
附件:ELISA实验中缓冲溶液等试剂的配置
ELISA实验中是以抗原和抗体的免疫反应为基础,ELISA试剂以及各种溶液如何配置?zui近刚做了下ELISA实验,把各种ELISA配置方法汇总如下:(1) ELISA实验包被缓冲液(2) ELISA实验洗涤缓冲液(2) ELISA实验洗涤缓冲液(3) ELISA实验稀释液;(4)ELISA实验终止液(5)ELISA底物缓冲液(6)小鼠ELISA试剂盒实验TMB(四甲基联苯胺)使用液(7) ELISA实验ABTS使用液(8)ELISC。
1,4-苯二硫醇(>98.0%(GC)) 英文名称: 1,4-Benzenedithiol 质量规格: >98.0%(GC) : 624-39-5
1,4-丁二胺双盐酸盐 英文名称: 1,4-Diaminobutane dihydrochloride 质量规格: >98%,BR : 333-93-7
1,4-丁二醇(BDO)(standard for GC,≥99%(GC)) 英文名称: 1,4-Butanediol 质量规格: standard for GC,≥99%(GC) : 110-63-4
1,4-丁炔二醇(Standard for GC, ≥99.5% (GC)) 英文名称: 2-Butyne-1,4-diol 质量规格: Standard for GC, ≥99.5% (GC) : 110-65-6
1,4-对苯醌(标准品) 英文名称: 1,4-Benzoquinone 质量规格: 系统适用性检查用 : 106-51-4
1,4-二(2-噻吩基)-1,3-丁二烯(>97.0%(GC)) 英文名称: 1,4-Di(2-thienyl)-1,3-butadiene 质量规格: >97.0%(GC) : 23354-93-0