抗体正确选择和使用
时间:2016-09-14 阅读:761
抗体正确选择和使用
1. 种属来源要匹配:根据所用一抗选定二抗。一般来说,如果一抗是小鼠原性,二抗应选择兔/山羊或其它种属抗小鼠的抗体。目前,美国Vector公司和Zymed公司都有开发的用小鼠抗体检测小鼠组织的试剂盒,即一抗来源于小鼠,该试剂盒采用了通用非特异性封闭液和封闭内源性小鼠Ig的封闭液,可以得到清晰的染色背景。
2. 注意抗体同种型和亚型:确定一抗同种型和亚型后,可以选择抗一抗来源种属广谱Ig或针对一抗亚型的二抗。如一抗是小鼠IgG1, 可以选用山羊抗小鼠的Ig或IgG1的二抗。
3. 正确使用:也需要重新选择稀释比例。一般从供应商提供稀释比例的1/10稀释度始,作5倍比稀释。