如果阴性对照没有染色而阳性对照标本弱阳性，除了考虑上述因素外，还应考虑：

  ① 标本的固定方式，不当的固定方式或固定时温度过高，都会影响到所检测的抗原的数量和质量。

   ② 不适当的抗原修复方式，由于石蜡切片在制作的过程中固定剂对抗原的封闭作用，必须用抗原热修复或酶消化或两种同时使用的抗原双暴露法，至于使用哪一种方法，应参照的说明，同时结合标本的具体情况而定。ELISA试剂盒

   ③ 抗体的稀释度是否过高或者孵育的温度/时间是否正确。一般试剂都会对试剂给出一定的使用范围，但是由于使用者的标本来自各种组织，处理过程也不尽相同，所以应参照使用范围，对所使用的一抗进行梯度测试，找出的使用浓度。

   ④ 切片上了过多的冲洗液，当抗体加至切片上时，等于人ELISA试剂盒为地对抗体进行了进一步的稀释。

   ⑤ 孵育时切片是否放置水平，否则会导致抗体流失。

  如果阴性对照没有反应，阳性对照反应良好，而标本弱阳性，则可能是由于阳性对照不是同一种组织、或固定方式不同等原因所致。