elisa试剂盒的参考标准
时间:2016-03-17 阅读:700
如有需要咨询产品的朋友。可以在本中留言,我们会在工作日中的*时间给您回复去的。今天我公司接收到了技术人员发来的实验整理。我公司为您解说进口elisa试剂盒实验的技术手段。
1、其抗原抗体反应具有高度的特异性。
2、将酶催化反应的放大作用和抗原抗体亲和反应的高度专一性、特异性相结合,以酶标记的抗原或抗体作为主要试剂进行免疫测试,所以具有很高的灵敏度。
3、实现了在细胞或亚细胞水平上示踪抗原或抗体的所在部位,或在微克、甚至纳克水平上对其进行定量。
进口elisa试剂盒实验可以说是免疫学反应应用到科研出产中zui为敏捷的技术手段,那么它的实验前有什么需要准备的?
按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用pH计测量较正。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。
除了这些之外,我们还需要根据自身需要选择96孔板或是48孔板进行ELISA实验。单克隆抗体和多克隆抗体都能够用于,实际上有时候二者结合效果更好。
我公司温馨提示:我公司高质量RD进口进口elisa试剂盒中使用了稀硫酸作为终止液,其具有轻微腐蚀性,使用时应避免接触衣物或眼、手等皮肤暴露部位。
2015年elisa试剂盒的参考标准你必须知道的事,你知道多少呢?下面是我公司技术人员对这些问题解决情况的一些办法和见解,欢迎大家拍砖指正。
*、标准曲线
1.定量方法:标准曲线至少由5个浓度组成,测定次数不少于5次,以确定工作浓度范围和IC50范围。
2.定性方法:工作浓度范围通过阴性、临界值浓度和阳性的样品测定来确定,每个浓度重复不少于5次,浓度与响应值之间应有一定的关系。
第二、检测限和定量限
1.检测限:20份空白样品测定均值加3倍标准差。
2.定量限:应大于标准曲线中zui低浓度点。对于定量方法,应对该浓度样品至少测定6次进行验证,而不能通过外延法推断。
第三、临界值(cut-off值)的确定
对于有zui高残留*的药物,检测方法的临界值为20份添加MRL浓度的样品重复3次测定的均值减去1.64倍标准差,即95%置信限处。
对于禁用药物,检测方法的临界值为定量限,该值应达到*的指标。
第四、精密度和准确度
对于有zui高残留*的药物,添加浓度为MRL及MRL上下各一个浓度;对于禁用药物,添加浓度为定量限和2倍定量限,每个添加浓度至少测定5个平行样,并至少进行3批实验(不同检测日期,不同标准曲线,不同批次试剂盒)。
1.准确度:回收率范围大于40%或符合相应检测标准的要求。
2.精密度:以变异系数表示。
批内变异系数:每批平行样之间的变异系数小于或等于25%,对于禁用药物小于或等于30%.
批间变异系数:所有样品之间的变异系数值小于或等于30%,elisa试剂盒对于禁用药物小于或等于40%.
定性方法:阴性和阳性样品各测定不少于50份,确定假阳性率和假阴性率。
第五、交叉反应
试剂盒与待检药物类似物、代谢物或共同存在的药物测定交叉反应率。
第六、保存期
保存期通过保存条件的稳定性试验结果确定。
第七、复核试验
1.定量方法:检测限、IC50以及至少两个添加浓度的准确度和精密度,并与理化方法(或与具代表性进口试剂盒)比较。
2.定性方法:检测限、假阳性率和假阴性率。elisa试剂盒